Javascript ayeuna ditumpurkeun dina panyungsi anjeun.Nalika JavaScript ditumpurkeun, sababaraha pungsi ramatloka ieu moal jalan.
Ngadaptarkeun detil khusus anjeun sareng ubar khusus anu dipikaresep, sareng kami bakal cocog sareng inpormasi anu anjeun bikeun sareng tulisan dina pangkalan data éksténsif kami sareng ngirim salinan PDF anjeun via email dina waktosna.
Naha nanopartikel anu langkung alit langkung saé?Ngartos épék biologis tina aggregation gumantung ukuran nanopartikel pérak dina kaayaan biologis relevan
Panulis: Bélteky P, Rónavári A, Zakupszky D, Boka E, Igaz N, Szerencsés B, Pfeiffer I, Vágvölgyi C, Kiricsi M, Kónya Z
Péter Bélteky,1,* Andrea Rónavári,1,* Dalma Zakupszky,1 Eszter Boka,1 Nóra Igaz,2 Bettina Szerencsés,3 Ilona Pfeiffer,3 Csaba Vágvölgyi,3 Mónika Kiricsi of Environmental Chemistry, Hungaria, Hungaria Informatika , Universitas Szeged;2 Jurusan Biokimia jeung Biologi Molekul, Fakultas Élmu sarta Émbaran, Universitas Szeged, Hungaria;3 Jurusan Mikrobiologi, Fakultas Élmu sarta Émbaran, Universitas Szeged, Hungaria;4MTA-SZTE Reaction Kinetics and Surface Chemistry Research Group, Szeged, Hungaria* Ieu pangarang nyumbang sarua dina karya ieu.Komunikasi: Zoltán Kónya Departemen Kimia Terapan sareng Lingkungan, Fakultas Élmu sareng Informatika, Universitas Szeged, Rerrich Square 1, Szeged, H-6720, Telepon Hungaria +36 62 544620 Surélék [Perlindungan email] Tujuan: Nanopartikel pérak (AgNPs) nyaéta salah sahiji bahan nano anu paling sering ditalungtik, khususna kusabab aplikasi biomedisna.Sanajan kitu, alatan aggregation of nanopartikel, cytotoxicity alus teuing maranéhanana sarta aktivitas antibakteri mindeng compromised dina média biologis.Dina karya ieu, paripolah aggregation jeung kagiatan biologis patali tilu sampel nanopartikel pérak citrate-terminated béda kalayan diaméter rata-rata 10, 20, sarta 50 nm anu ditalungtik.Métode: Anggo mikroskop éléktron transmisi pikeun nyintésis sareng ngacirian partikel nano, évaluasi paripolah agrégasina dina rupa-rupa nilai pH, konsentrasi NaCl, glukosa sareng glutamin ku paburencay cahaya dinamis sareng spéktroskopi anu katingali ku ultraviolét.Sajaba ti éta, dina kultur sél komponén sedeng kayaning Dulbecco ngaronjatkeun kabiasaan aggregation di Eagle Medium jeung fétal anak sapi sérum.Hasilna: Hasilna nunjukkeun yén pH asam sareng eusi éléktrolit fisiologis umumna nyababkeun agrégasi skala mikron, anu tiasa dimédiasi ku formasi korona biomolekul.Perhatos yén partikel anu langkung ageung nunjukkeun résistansi anu langkung luhur pikeun pangaruh éksternal tibatan anu langkung alit.Uji sitotoksisitas in vitro sareng antibakteri dilakukeun ku ngarawat sél nganggo agrégat nanopartikel dina tahapan agrégat anu béda.Kacindekan: Hasil kami nembongkeun korelasi profound antara stabilitas koloid jeung karacunan AgNPs, sakumaha aggregation ekstrim ngabalukarkeun leungitna lengkep aktivitas biologis.Tingkat luhur anti agrégasi dititénan pikeun partikel nu leuwih gede boga dampak signifikan dina karacunan in vitro, sabab sampel sapertos nahan aktivitas sél leuwih antimikrobial jeung mamalia.Papanggihan ieu ngakibatkeun kacindekan yén, sanajan pamadegan umum dina literatur relevan, nargétkeun nanopartikel pangleutikna mungkin teu kursus pangalusna tina aksi.Konci: pertumbuhan dimédiasi siki, stabilitas koloid, paripolah agrégasi gumantung ukuran, karacunan karuksakan agrégasi
Nalika paménta sareng kaluaran nanomaterial terus ningkat, beuki seueur perhatian anu dibayar ka biosafety atanapi kagiatan biologisna.Nanopartikel pérak (AgNPs) mangrupikeun salah sahiji wakil anu paling sering disintésis, ditalungtik sareng dianggo tina bahan kelas ieu kusabab sipat katalitik, optik sareng biologis anu saé.1 Umumna dipercaya yén karakteristik unik tina nanomaterials (kaasup AgNPs) utamana dikaitkeun kana aréa permukaan spésifik badag maranéhanana.Ku alatan éta, masalah inevitably nyaeta sagala prosés nu mangaruhan fitur konci ieu, kayaning ukuran partikel, palapis permukaan Atawa aggregation, naha éta parah bakal ngaruksak sipat nanopartikel anu kritis kana aplikasi husus.
Balukar ukuran partikel sareng penstabil mangrupikeun subyek anu parantos didokumentasikeun sacara saé dina literatur.Contona, panempoan anu ditarima sacara umum nyaéta nanopartikel anu leuwih leutik leuwih toksik ti batan nanopartikel gedé.2 Konsisten jeung literatur umum, studi kami saméméhna geus nunjukkeun aktivitas ukuran-gumantung nanosilver on sél mamalia jeung mikroorganisme.3- 5 Lapisan permukaan mangrupikeun atribut sanés anu gaduh pangaruh anu lega kana sipat nanomaterial.Ngan ku nambahkeun atawa ngaropéa stabilisator dina beungeut cai, nanomaterial sarua bisa mibanda sipat fisik, kimia, jeung biologis lengkep béda.Aplikasi agén capping paling sering dilakukeun salaku bagian tina sintésis nanopartikel.Contona, nanopartikel pérak citrate-terminated mangrupakeun salah sahiji AgNPs paling relevan dina panalungtikan, nu disintésis ku cara ngurangan uyah pérak dina leyuran penstabil dipilih salaku medium réaksi.6 Sitrat bisa kalayan gampang ngamangpaatkeun béaya rendah na, kasadiaan, biocompatibility, sarta pangirut kuat pikeun pérak, nu bisa reflected dina sagala rupa interaksi diusulkeun, ti adsorption permukaan malik ka interaksi ionik.Molekul leutik sareng ion poliatomik caket 7,8, sapertos sitrat, polimér, poliéléktrolit, sareng agén biologis ogé biasa dianggo pikeun nyaimbangkeun nano-pérak sareng ngalaksanakeun fungsionalisasi unik dina éta.9-12
Sanajan kamungkinan ngarobah aktivitas nanopartikel ku capping permukaan ngahaja mangrupakeun aréa pisan metot, peran utama palapis permukaan ieu negligible, nyadiakeun stabilitas koloid pikeun sistem nanopartikel.Wewengkon permukaan spésifik ageung tina nanomaterial bakal ngahasilkeun énergi permukaan anu ageung, anu ngahalangan kamampuan térmodinamik sistem pikeun ngahontal énergi minimumna.13 Tanpa stabilisasi anu leres, ieu tiasa nyababkeun aglomerasi bahan nano.Aggregation nyaéta formasi agrégat partikel tina rupa-rupa wangun jeung ukuran anu lumangsung nalika partikel dispersed papanggih jeung interaksi termodinamika ayeuna ngidinan partikel pikeun taat ka silih.Ku alatan éta, penstabil dipaké pikeun nyegah agrégasi ku cara ngawanohkeun gaya repulsive cukup badag antara partikel pikeun counteract daya tarik termodinamika maranéhanana.14
Sanajan subyek ukuran partikel jeung cakupan permukaan geus tuntas digali dina konteks pangaturan na kagiatan biologis dipicu ku nanopartikel, aggregation partikel mangrupakeun wewengkon sakitu legana diabaikan.Aya ampir euweuh ulikan teleb pikeun ngajawab stabilitas koloid nanopartikel dina kaayaan biologis relevan.10,15-17 Salaku tambahan, kontribusi ieu jarang pisan, dimana karacunan anu aya hubunganana sareng agrégasi ogé parantos ditaliti, sanaos tiasa nyababkeun réaksi ngarugikeun, sapertos trombosis vaskular, atanapi leungitna ciri anu dipikahoyong, sapertos karacunanna, ditémbongkeun dina Gambar 1.18, 19 ditémbongkeun.Kanyataanna, salah sahiji mékanisme dipikawanoh résistansi nanopartikel pérak aya patalina jeung aggregation, sabab tangtu E. coli jeung Pseudomonas aeruginosa galur dilaporkeun ngurangan sensitipitas nano-pérak maranéhna ku nganyatakeun flagellin protéin, flagellin.Mibanda afinitas tinggi pikeun pérak, kukituna inducing aggregation.20
Aya sababaraha mékanisme béda anu patali jeung karacunan nanopartikel pérak, sarta aggregation mangaruhan sakabéh mékanisme ieu.Metodeu aktivitas biologis AgNP anu paling dibahas, sok disebut salaku mékanisme "Kuda Trojan", nganggap AgNPs salaku operator Ag +.1,21 Mékanisme kuda Trojan bisa mastikeun paningkatan badag dina konsentrasi Ag + lokal, nu ngabalukarkeun generasi naros na depolarization mémbran.22-24 Aggregation bisa mangaruhan sékrési Ag+, kukituna mangaruhan karacunan, sabab ngurangan permukaan aktif éféktif dimana ion pérak bisa dioksidasi jeung leyur.Sanajan kitu, AgNPs moal ukur némbongkeun karacunan ngaliwatan sékrési ion.Loba ukuran jeung interaksi patali morfologi kudu dianggap.Diantarana, ukuran sareng bentuk permukaan nanopartikel mangrupikeun ciri anu nangtukeun.4,25 Koléksi mékanisme ieu tiasa dikategorikeun salaku "mékanisme karacunan anu diinduksi."Aya kamungkinan seueur réaksi mitokondria sareng mémbran permukaan anu tiasa ngaruksak organél sareng nyababkeun maot sél.25-27 Kusabab kabentukna agrégat sacara alami mangaruhan ukuran sareng bentuk objék anu ngandung pérak anu dikenal ku sistem hirup, interaksi ieu ogé tiasa kapangaruhan.
Dina makalah kami saméméhna dina aggregation of nanopartikel pérak, urang nunjukkeun hiji prosedur screening éféktif diwangun ku kimiawi sarta in vitro percobaan biologis pikeun nalungtik masalah ieu.19 Dynamic Light Scattering (DLS) mangrupikeun téknik anu dipikaresep pikeun jinis pamariksaan ieu kusabab bahanna tiasa nyebarkeun foton dina panjang gelombang anu dibandingkeun sareng ukuran partikelna.Kusabab laju gerak Brownian partikel dina medium cair patali jeung ukuran, parobahan inténsitas cahaya sumebar bisa dipaké pikeun nangtukeun rata-rata diaméter hidrodinamika (Z-hartosna) sampel cair.28 Sajaba ti éta, ku cara nerapkeun tegangan kana sampel, poténsi zeta (ζ poténsi) nanopartikel bisa diukur sarua jeung nilai Z rata-rata.13,28 Lamun nilai mutlak poténsi zeta cukup luhur (nurutkeun tungtunan umum> ± 30 mV), bakal ngahasilkeun repulsion éléktrostatik kuat antara partikel counteract aggregation nu.Résonansi plasmon permukaan karakteristik (SPR) nyaéta fenomena optik unik, utamana attributed ka nanopartikel logam mulia (utamana Au jeung Ag).29 Dumasar kana osilasi éléktronik (plasmon permukaan) bahan-bahan ieu dina skala nano, dipikanyaho yén AgNPs buleud gaduh puncak nyerep UV-Vis anu karakteristik caket 400 nm.30 Inténsitas sareng pergeseran panjang gelombang partikel dianggo pikeun nambihan hasil DLS, sabab metode ieu tiasa dianggo pikeun ngadeteksi agrégasi nanopartikel sareng adsorpsi permukaan biomolekul.
Dumasar kana inpormasi anu dicandak, uji viability sél (MTT) sareng antibakteri dilakukeun ku cara anu karacunan AgNP digambarkeun salaku fungsi tingkat agrégasi, tinimbang (faktor anu paling sering dianggo) konsentrasi nanopartikel.Metoda unik ieu ngamungkinkeun urang pikeun demonstrate pentingna profound tingkat aggregation dina aktivitas biologis, sabab, contona, citrate-terminated AgNPs sagemblengna leungit aktivitas biologis maranéhanana dina sababaraha jam alatan aggregation.19
Dina karya ayeuna, urang boga tujuan pikeun greatly dilegakeun kontribusi kami saméméhna dina stabilitas koloid nu patali bio jeung dampak maranéhanana dina aktivitas biologis ku diajar pangaruh ukuran nanopartikel on aggregation nanopartikel.Ieu undoubtedly salah sahiji ulikan ngeunaan nanopartikel.Hiji sudut pandang luhur-profil jeung 31 Pikeun nalungtik masalah ieu, metoda tumuwuh-dimédiasi siki dipaké pikeun ngahasilkeun AgNPs sitrat-terminated dina tilu rentang ukuran béda (10, 20, jeung 50 nm).6,32 salaku salah sahiji metodeu anu paling umum.Pikeun nanomaterials anu lega tur rutin dipaké dina aplikasi médis, AgNPs citrate-terminated ukuran béda dipilih pikeun nalungtik kamungkinan gumantungna ukuran tina sipat biologis nu patali aggregation of nanosilver.Saatos nyintésis AgNPs tina ukuran anu béda, urang dicirikeun sampel anu dihasilkeun ku transmisi mikroskop éléktron (TEM), lajeng nalungtik partikel ngagunakeun prosedur screening disebut tadi.Salaku tambahan, ku ayana kultur sél in vitro Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) sareng Fetal Bovine Serum (FBS), paripolah agrégasi anu gumantung kana ukuran sareng paripolahna dievaluasi dina rupa-rupa nilai pH, NaCl, glukosa, sareng konsentrasi glutamin.Karakteristik sitotoksisitas ditangtukeun dina kaayaan komprehensif.Konsensus ilmiah nunjukkeun yén sacara umum, partikel leutik leuwih hade;panalungtikan urang nyadiakeun platform kimia jeung biologis pikeun nangtukeun naha ieu téh pasualan.
Tilu nanopartikel pérak kalayan rentang ukuran anu béda-béda disiapkeun ku padika pertumbuhan anu dimédiasi ku siki anu diusulkeun ku Wan et al., kalayan sakedik panyesuaian.6 Métode ieu dumasar kana réduksi kimiawi, ngagunakeun pérak nitrat (AgNO3) salaku sumber pérak, natrium borohidrida (NaBH4) salaku agén réduksi, sarta natrium sitrat salaku penstabil.Mimiti, nyiapkeun 75 mL larutan cai sitrat 9 mM tina natrium sitrat dihidrat (Na3C6H5O7 x 2H2O) sareng panaskeun dugi ka 70 ° C.Lajeng, 2 mL 1% w/v AgNO3 solusi ditambahkeun kana médium réaksi, lajeng larutan natrium borohidrida anyar disiapkeun (2 mL 0,1% w/v) dituang kana campuran dropwise.Suspénsi konéng-coklat anu dihasilkeun disimpen dina 70 ° C kalayan diaduk kuat salami 1 jam, teras tiis kana suhu kamar.Sampel nu dihasilkeun (disebut AgNP-I ti ayeuna) dipaké salaku dadasar pikeun tumuwuh-dimédiasi siki dina hambalan sintésis salajengna.
Pikeun nyintésis gantung partikel sedeng-ukuran (dilambangkeun salaku AgNP-II), panas 90 ml 7,6 mM solusi sitrat nepi ka 80 ° C, campur jeung 10 mL AgNP-I, lajeng campur 2 ml 1% w/v solusi AgNO3. Ieu diteundeun dina aduk mékanis vigorous salila 1 jam, lajeng sampel ieu leuwih tiis kana suhu kamar.
Pikeun partikel panggedena (AgNP-III), ngulang prosés tumuwuhna sarua, tapi dina hal ieu, make 10 ml AgNP-II salaku suspénsi siki.Saatos sampel ngahontal suhu kamar, aranjeunna nyetel konsentrasi Ag nominal maranéhanana dumasar kana total eusi AgNO3 ka 150 ppm ku cara nambahkeun atawa evaporating pangleyur tambahan dina 40 ° C, sarta tungtungna nyimpen aranjeunna dina 4 ° C nepi ka pamakéan salajengna.
Anggo FEI Tecnai G2 20 X-Twin Transmission Electron Microscope (TEM) ( Markas Perusahaan FEI, Hillsboro, Oregon, AS) kalayan tegangan akselerasi 200 kV pikeun nguji ciri morfologis nanopartikel sareng néwak pola difraksi éléktron (ED).Sahenteuna 15 gambar wawakil (~ 750 partikel) dievaluasi nganggo pakét parangkat lunak ImageJ, sareng hasil histograms (sareng sadaya grafik dina sakabéh pangajaran) didamel dina OriginPro 2018 (OriginLab, Northampton, MA, USA) 33, 34.
Diaméter hidrodinamika rata-rata (Z-rata), poténsi zeta (ζ-poténsial) sareng résonansi plasmon permukaan karakteristik (SPR) tina sampel diukur pikeun ngagambarkeun sipat koloid awalna.Diaméter hidrodinamika rata-rata sareng poténsi zeta tina sampel diukur ku alat Malvern Zetasizer Nano ZS (Instrumén Malvern, Malvern, Inggris) ngagunakeun sél kapilér anu dilipat disposable dina 37 ± 0,1 ° C.Samudra Optik 355 DH-2000-BAL UV-Vis spéktrofotométer (Halma PLC, Largo, FL, AS) ieu dipaké pikeun ménta ciri SPR ciri tina spéktra nyerep UV-Vis sampel dina rentang 250-800 nm.
Salila sakabeh percobaan, tilu tipe pangukuran béda patali stabilitas koloid dilaksanakeun dina waktos anu sareng.Anggo DLS pikeun ngukur rata-rata diaméter hidrodinamik (Z rata-rata) sareng poténsi zeta (ζ poténsi) partikel, sabab Z rata-rata aya hubunganana sareng ukuran rata-rata agrégat nanopartikel, sareng poténsi zeta nunjukkeun naha répulsi éléktrostatik dina sistem. cukup kuat pikeun ngimbangan daya tarik Van der Waals antara nanopartikel.Pangukuran dilakukeun dina rangkep tilu, sareng simpangan baku tina Z mean sareng poténsi zeta diitung ku software Zetasizer.Spéktra spéktra SPR partikel dievaluasi ku spéktroskopi UV-Vis, sabab parobahan inténsitas puncak sareng panjang gelombang tiasa nunjukkeun agrégasi sareng interaksi permukaan.29,35 Kanyataanna, résonansi plasmon permukaan dina logam mulia téh jadi pangaruh nu geus ngarah ka métode anyar analisis biomolekul.29,36,37 Konsentrasi AgNPs dina campuran ékspérimén nyaéta ngeunaan 10 ppm, sarta tujuanana pikeun ngeset inténsitas nyerep SPR awal maksimum ka 1. Percobaan ieu dilumangsungkeun dina ragam gumantung-waktu dina 0;1.5;3;6;12 sareng 24 jam dina sababaraha kaayaan anu relevan sacara biologis.Langkung seueur rinci ngeunaan percobaan tiasa ditingali dina padamelan urang sateuacana.19 Pondokna, rupa-rupa nilai pH (3; 5; 7.2 jeung 9), béda natrium klorida (10 mM; 50 mM; 150 mM), glukosa (3.9 mM; 6.7 mM) jeung glutamine (4 mM), jeung ogé nyiapkeun Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) sareng Fetal Bovine Serum (FBS) (dina cai sareng DMEM) salaku sistem modél, sareng ngulik épékna dina paripolah agrégasi tina nanopartikel pérak anu disintésis.pH Nilai, NaCl, glukosa, sareng glutamin dievaluasi dumasar kana konsentrasi fisiologis, sedengkeun jumlah DMEM sareng FBS sami sareng tingkat anu dianggo dina sadaya percobaan in vitro.38-42 Sadaya pangukuran dilakukeun dina pH 7,2 sareng 37 ° C kalayan konsentrasi uyah latar konstan 10 mM NaCl pikeun ngaleungitkeun interaksi partikel jarak jauh (iwal percobaan anu aya hubunganana sareng pH sareng NaCl, dimana atribut ieu mangrupikeun variabel dina kaayaan ieu. ulikan).28 Daptar rupa-rupa kaayaan diringkeskeun dina Tabél 1. Ékspérimén anu ditandaan ku † dipaké salaku référénsi sarta pakait jeung sampel nu ngandung 10 mM NaCl jeung pH 7,2.
Garis sél kanker prostat manusa (DU145) sareng keratinosit manusa anu diabadikeun (HaCaT) dicandak tina ATCC (Manassas, VA, AS).Sél sacara rutin dibudidayakeun dina Dulbecco's minimum essential medium Eagle (DMEM) ngandung 4,5 g/L glukosa (Sigma-Aldrich, Saint Louis, MO, AS), ditambah ku 10% FBS, 2 mM L-glutamine, 0,01 % Streptomycin sareng 0,005% Pénisilin (Sigma-Aldrich, St. Louis, Missouri, AS).Sél dibudidayakeun dina inkubator 37 ° C dina 5% CO2 sareng kalembaban 95%.
Pikeun ngajalajah parobihan dina sitotoksisitas AgNP disababkeun ku agrégasi partikel dina cara anu gumantung kana waktos, uji MTT dua léngkah dilaksanakeun.Kahiji, viability tina dua jenis sél diukur sanggeus perlakuan jeung AgNP-I, AgNP-II jeung AgNP-III.Pikeun tujuan ieu, dua jenis sél ieu seeded kana 96-sumur pelat dina dénsitas 10.000 sél / sumur tur dirawat kalayan tilu ukuran béda tina nanopartikel pérak dina ngaronjatkeun konsentrasi dina poé kadua.Saatos 24 jam perlakuan, sél dikumbah ku PBS sareng diinkubasi ku réagen 0,5 mg / mL MTT (SERVA, Heidelberg, Jérman) éncér dina medium kultur salami 1 jam dina 37 ° C.Kristal Formazan dibubarkeun dina DMSO (Sigma-Aldrich, Saint Louis, MO, AS), sareng nyerepna diukur dina 570 nm nganggo pamaca plat Synergy HTX (BioTek-Hungary, Budapest, Hungaria).Nilai nyerep sampel kontrol untreated dianggap 100% laju survival.Laksanakeun sahenteuna 3 percobaan nganggo opat ulangan biologis mandiri.IC50 diitung tina kurva respon dosis dumasar kana hasil vitalitas.
Saterusna, dina hambalan kadua, ku incubating partikel jeung 150 mM NaCl pikeun période béda waktu (0, 1,5, 3, 6, 12, jeung 24 jam) saméméh perlakuan sél, kaayaan aggregation béda nanopartikel pérak dihasilkeun.Salajengna, assay MTT anu sami dilakukeun sapertos anu ditétélakeun sateuacana pikeun ngévaluasi parobahan viability sél anu kapangaruhan ku agrégasi partikel.Anggo GraphPad Prisma 7 pikeun meunteun hasil ahir, ngitung signifikansi statistik tina ékspérimén ku unpaired t-test, sarta cirian tingkatna * (p ≤ 0,05), ** (p ≤ 0,01), *** (p ≤ 0,001 ) Jeung **** (p ≤ 0,0001).
Tilu ukuran anu béda tina nanopartikel pérak (AgNP-I, AgNP-II sareng AgNP-III) dianggo pikeun karentanan antibakteri kana Cryptococcus neoformans IFM 5844 (IFM; Pusat Panaliti pikeun Patogenik Fungi sareng Toksikologi Mikroba, Universitas Chiba) sareng Bacillus Test megaterium SZMC 6031 (SZMC: Szeged Mikrobiologi Koléksi) jeung E. coli SZMC 0582 di RPMI 1640 sedeng (Sigma-Aldrich Co.).Dina raraga evaluate parobahan aktivitas antibakteri disababkeun ku aggregation partikel, kahiji, konsentrasi inhibitory minimum maranéhanana (MIC) ditangtukeun ku microdilution dina piring microtiter 96-sumur.Pikeun 50 μL gantung sél standarisasi (5 × 104 sél / ml dina RPMI 1640 sedeng), tambahkeun 50 μL gantung nanopartikel pérak sareng séri éncér dua kali konsentrasi (dina médium anu disebut tadi, kisaran 0 sareng 75 ppm, nyaéta, sampel kontrol ngandung 50 μL gantung sél jeung 50 μL sedeng tanpa nanopartikel).Salajengna, piring diinkubasi dina 30 ° C salami 48 jam, sareng dénsitas optik budaya diukur dina 620 nm nganggo pamaca plat Nano SPECTROstar (BMG LabTech, Offenburg, Jérman).Percobaan dilaksanakeun tilu kali dina rangkep tilu.
Iwal ti 50 μL sampel nanopartikel agrégat tunggal dipaké dina waktu ieu, prosedur sarua sakumaha ditétélakeun saméméhna dipaké pikeun nalungtik pangaruh aggregation on aktivitas antibakteri dina galur disebut tadi.Kaayaan agrégasi béda tina nanopartikel pérak dihasilkeun ku inkubasi partikel kalawan 150 mM NaCl pikeun période waktu béda (0, 1,5, 3, 6, 12, jeung 24 jam) saméméh ngolah sél.Suspénsi anu ditambahan ku 50 μL medium RPMI 1640 dianggo salaku kontrol pertumbuhan, sedengkeun pikeun ngontrol karacunan, suspénsi sareng nanopartikel non-agregat dianggo.Percobaan dilaksanakeun tilu kali dina rangkep tilu.Anggo GraphPad Prism 7 pikeun ngévaluasi deui hasil ahir, ngagunakeun analisis statistik anu sami sareng analisis MTT.
Tingkat agrégasi partikel pangleutikna (AgNP-I) parantos dicirian, sareng hasilna sawaréh diterbitkeun dina padamelan urang sateuacana, tapi pikeun ngabandingkeun anu langkung saé, sadaya partikel disaring sacara saksama.Data ékspérimén dikumpulkeun sarta dibahas dina bagian handap.Tilu ukuran AgNP.19
Pangukuran anu dilakukeun ku TEM, UV-Vis sareng DLS marios kasuksesan sintésis sadaya sampel AgNP (Gambar 2A-D).Numutkeun baris kahiji Gambar 2, partikel pangleutikna (AgNP-I) nembongkeun morfologi buleud seragam kalayan diaméter rata-rata kira-kira 10 nm.Métode pertumbuhan anu dimédiasi ku siki ogé nyayogikeun AgNP-II sareng AgNP-III kalayan rentang ukuran anu béda kalayan diaméter partikel rata-rata kirang langkung 20 nm sareng 50 nm, masing-masing.Numutkeun simpangan baku tina distribusi partikel, ukuran tina tilu sampel teu tumpang tindih, nu penting pikeun analisis komparatif maranéhanana.Ku ngabandingkeun rasio aspék rata jeung rasio thinness tina projections 2D partikel dumasar-TEM, eta dianggap yén sphericity partikel ieu dievaluasi ku ImageJ urang bentuk filter plug-in (Gambar 2E).43 Numutkeun analisis bentuk partikel, rasio aspék maranéhna (sisi badag / sisi pondok tina sagi opat beungkeutan pangleutikna) teu kapangaruhan ku tumuwuhna partikel, sarta ratio thinness maranéhanana (wewengkon diukur tina bunderan sampurna / aréa teoritis pakait. ) saeutik demi saeutik ngurangan.Ieu ngakibatkeun beuki loba partikel polyhedral, nu sampurna buleud dina teori, pakait jeung ratio thinness 1.
Gambar 2 Gambar mikroskop éléktron transmisi (TEM) (A), pola difraksi éléktron (ED) (B), histogram distribusi ukuran (C), spéktrum serapan cahaya ultraviolét-visible (UV-Vis) karakteristik (D), jeung cairan rata-rata sitrat. nanopartikel pérak -terminated kalayan diaméter mékanis (Z-rata-rata), poténsi zeta, rasio aspék sarta rasio ketebalan (E) boga tilu rentang ukuran béda: AgNP-I nyaeta 10 nm (baris luhur), AgNP -II nyaeta 20 nm (baris tengah. ), AgNP-III (baris handap) nyaéta 50 nm.
Sanajan sipat siklik tina metoda tumuwuhna mangaruhan bentuk partikel kana extent sababaraha, hasilna sphericity leutik AgNPs gedé, tilu sampel tetep kuasi-bulat.Sajaba ti éta, ditémbongkeun saperti dina pola difraksi éléktron dina Gambar 2B, nano The kristalinitas partikel teu kapangaruhan.Cincin difraksi nonjol-anu tiasa dihubungkeun sareng (111), (220), (200), sareng (311) indéks Miller pérak-konsisten pisan sareng literatur ilmiah sareng kontribusi urang sateuacana.9, 19,44 Fragméntasi cincin Debye-Scherrer AgNP-II sareng AgNP-III disababkeun ku kanyataan yén gambar ED kawengku dina pembesaran anu sami, ku kituna ukuran partikel ningkat, jumlah partikel anu difraksi per aréa unit nambahan sarta ngurangan.
Ukuran jeung wangun nanopartikel dipikanyaho mangaruhan aktivitas biologis.3,45 Bentuk-gumantung aktivitas katalitik jeung biologis bisa dipedar ku kanyataan yén wangun béda condong proliferasi rupa kristal tangtu (gaduh indéks Miller béda), sarta rupa kristal ieu mibanda aktivitas béda.45,46 Kusabab partikel disusun nyadiakeun hasil ED sarupa pakait jeung ciri kristal pisan sarupa, bisa dianggap yén dina stabilitas koloid saterusna urang jeung percobaan aktivitas biologis, sagala béda observasi kudu attributed ka ukuran Nanopartikel, teu sipat-patali bentuk.
Hasil UV-Vis diringkeskeun dina Gambar 2D salajengna nekenkeun sipat buleud overwhelming tina AgNP disintésis, sabab puncak SPR tina tilu sampel téh sabudeureun 400 nm, nu mangrupakeun nilai karakteristik nanopartikel pérak buleud.29,30 Spéktra anu kawengku ogé mastikeun yén suksés dimédiasi bibit nanosilver.Salaku ukuran partikel nambahan, panjang gelombang pakait jeung nyerep cahaya maksimum AgNP-II-leuwih nonjol-Numutkeun literatur, AgNP-III ngalaman redshift a.6,29
Ngeunaan stabilitas koloid awal sistem AgNP, DLS digunakeun pikeun ngukur rata-rata diaméter hidrodinamik sareng poténsi zeta partikel dina pH 7.2.Hasilna digambarkeun dina Gambar 2E némbongkeun yén AgNP-III boga stabilitas koloid leuwih luhur batan AgNP-I atawa AgNP-II, sabab tungtunan umum nunjukkeun yén poténsi zeta of 30 mV mutlak diperlukeun pikeun stabilitas koloid jangka panjang Pananjung ieu salajengna dirojong lamun nilai Z rata-rata (diaméter rata-rata hidrodinamika partikel bébas sareng agrégat) dibandingkeun sareng ukuran partikel primér anu dicandak ku TEM, sabab langkung caket dua nilai, langkung hampang darajat Kumpul dina sampel.Nyatana, rata-rata Z AgNP-I sareng AgNP-II lumayan langkung luhur tibatan ukuran partikel anu dievaluasi TEM utama, janten dibandingkeun sareng AgNP-III, conto ieu diprediksi langkung dipikaresep pikeun agrégat, dimana poténsi zeta négatip pisan. ieu dipirig ku ukuran nutup nilai rata Z.
Katerangan pikeun fenomena ieu tiasa dua kali.Di hiji sisi, konsentrasi sitrat dipertahankeun dina tingkat anu sami dina sadaya léngkah sintésis, nyayogikeun jumlah gugus permukaan anu kawilang luhur pikeun nyegah permukaan khusus partikel anu tumuwuh tina turunna.Sanajan kitu, nurutkeun Levak et al., molekul leutik kawas sitrat bisa gampang disilihtukeurkeun ku biomolekul dina beungeut nanopartikel.Dina hal ieu, stabilitas koloid bakal ditangtukeun ku korona biomolekul dihasilkeun.31 Kusabab kabiasaan ieu ogé dititénan dina pangukuran aggregation urang (dibahas dina leuwih jéntré engké), citrate capping nyalira teu bisa ngajelaskeun fenomena ieu.
Di sisi séjén, ukuran partikel tibalik tibalik ka kacenderungan aggregation dina tingkat nanométer.Ieu utamana dirojong ku métode tradisional Derjaguin-Landau-Verwey-Overbeek (DLVO), dimana daya tarik partikel digambarkeun salaku jumlah gaya pikaresepeun tur repulsive antara partikel.Numutkeun He et al., nilai maksimum kurva énergi DLVO nurun kalawan ukuran nanopartikel dina nanopartikel hematite, sahingga leuwih gampang pikeun ngahontal énergi primér minimum, kukituna promosi aggregation teu bisa balik (kondensasi).47 Sanajan kitu, ieu spekulasi yén aya aspék séjén saluareun watesan téori DLVO.Sanajan van der Waals gravitasi jeung éléktrostatik ganda-lapisan repulsion sarupa jeung ngaronjatna ukuran partikel, review ku Hotze et al.proposes yén éta miboga éfék kuat dina aggregation ti DLVO ngamungkinkeun.14 Aranjeunna yakin yén curvature permukaan nanopartikel teu bisa deui diperkirakeun salaku permukaan datar, sahingga estimasi matematik teu bisa dipake.Sajaba ti éta, salaku ukuran partikel nurun, persentase atom hadir dina beungeut cai jadi leuwih luhur, ngarah kana struktur éléktronik jeung kabiasaan muatan permukaan.Jeung parobahan réaktivitas permukaan, nu bisa ngakibatkeun panurunan dina muatan dina lapisan ganda listrik jeung ngamajukeun aggregation.
Nalika ngabandingkeun hasil DLS AgNP-I, AgNP-II, sareng AgNP-III dina Gambar 3, urang niténan yén sadaya tilu sampel nunjukkeun pH anu sami anu nyababkeun agrégasi.Lingkungan asam beurat (pH 3) ngageser poténsi zeta tina sampel ka 0 mV, ngabalukarkeun partikel ngabentuk agrégat ukuran micron, sedengkeun pH basa ngageser poténsi zeta na ka nilai négatip nu leuwih gede, dimana partikel ngabentuk agrégat leutik (pH 5). ).Jeung 7.2) ), atawa tetep sagemblengna unaggregated (pH 9).Sababaraha béda penting antara sampel béda ogé katalungtik.Sapanjang percobaan, AgNP-I kabuktian paling sénsitip kana pH-ngainduksi parobahan poténsi zeta, sabab poténsi zeta partikel ieu geus ngurangan di pH 7,2 dibandingkeun pH 9, sedengkeun AgNP-II jeung AgNP-III ngan némbongkeun A. parobahan considerable di ζ nyaeta sabudeureun pH 3. Sajaba ti éta, AgNP-II némbongkeun parobahan laun tur poténsi zeta sedeng, bari AgNP-III némbongkeun kabiasaan mildest tina tilu, sabab sistem némbongkeun nilai zeta mutlak pangluhurna sarta gerakan trend slow, nunjukkeun AgNP-III Paling tahan ka pH-ngainduksi aggregation.Hasil ieu konsisten sareng rata-rata hasil pangukuran diameter hidrodinamik.Mertimbangkeun ukuran partikel primers maranéhanana, AgNP-I némbongkeun aggregation bertahap konstan dina sakabéh nilai pH, paling dipikaresep alatan kasang tukang 10 mM NaCl, sedengkeun AgNP-II jeung AgNP-III ngan némbongkeun signifikan dina pH 3 Of gathering.Beda anu paling pikaresepeun nyaéta sanajan ukuran nanopartikelna ageung, AgNP-III ngabentuk agrégat pangleutikna dina pH 3 dina 24 jam, nyorot sipat anti agrégat na.Ku ngabagi Z rata-rata AgNPs dina pH 3 saatos 24 jam ku nilai sampel anu disiapkeun, tiasa dititénan yén ukuran agrégat relatif AgNP-I sareng AgNP-II parantos ningkat ku 50 kali, 42 kali, sareng 22 kali. , masing-masing.III.
Gambar 3 Hasil panyebaran cahaya dinamis tina sampel nanopartikel pérak citrate-terminated kalayan ukuran ngaronjatna (10 nm: AgNP-I, 20 nm: AgNP-II jeung 50 nm: AgNP-III) dinyatakeun salaku diaméter hidrodinamik rata-rata (Z rata-rata. ) (katuhu) Dina kaayaan pH béda, poténsi zeta (kénca) robah dina 24 jam.
Aggregation gumantung pH observasi ogé mangaruhan résonansi plasmon permukaan karakteristik (SPR) tina sampel AgNP, sakumaha dibuktikeun ku spéktra UV-Vis maranéhanana.Numutkeun Gambar Suplemén S1, agrégasi sadaya tilu suspénsi nanopartikel pérak dituturkeun ku pangurangan inténsitas puncak SPR sareng pergeseran beureum sedeng.Legana parobahan ieu salaku fungsi pH konsisten jeung darajat aggregation diprediksi ku hasil DLS, kumaha oge, sababaraha tren metot geus katalungtik.Sabalikna tina intuisi, tétéla yén AgNP-II ukuran sedeng anu paling sénsitip kana parobahan SPR, sedengkeun dua sampel séjén kirang sénsitip.Dina panalungtikan SPR, 50 nm nyaéta wates ukuran partikel téoritis, anu digunakeun pikeun ngabédakeun partikel dumasar kana sipat diéléktrikna.Partikel nu leuwih leutik batan 50 nm (AgNP-I jeung AgNP-II) bisa digambarkeun salaku dipol diéléktrik basajan, sedengkeun partikel nu ngahontal atawa ngaleuwihan wates ieu (AgNP-III) mibanda sipat diéléktrik nu leuwih kompleks, sarta résonansi maranéhanana Pita beulah jadi parobahan multimodal. .Dina kasus dua sampel partikel nu leuwih leutik, AgNPs bisa dianggap salaku dipol basajan, sarta plasma bisa gampang tumpang tindih.Nalika ukuran partikel nambahan, gandeng ieu dasarna ngahasilkeun plasma nu leuwih gede, nu bisa ngajelaskeun sensitipitas luhur observasi.29 Tapi, pikeun partikel panggedena, estimasi dipole basajan teu valid lamun kaayaan gandeng séjén ogé bisa lumangsung, nu bisa ngajelaskeun kacenderungan turun AgNP-III pikeun nunjukkeun parobahan spéktral.29
Dina kaayaan ékspérimén urang, éta kabuktian yén nilai pH boga pangaruh profound on stabilitas koloid nanopartikel pérak citrate-coated tina sagala rupa ukuran.Dina sistem ieu, stabilitas disadiakeun ku gugus -COO- muatan négatip dina beungeut AgNPs.Gugus fungsi karboksilat ion sitrat diprotonasi dina sajumlah badag ion H+, ku kituna gugus karboksil nu dihasilkeun teu bisa deui nyadiakeun répulsi éléktrostatik antara partikel, ditémbongkeun saperti dina baris luhur Gambar 4. Nurutkeun prinsip Le Chatelier, AgNP. sampel gancang agrégat dina pH 3, tapi laun-laun jadi beuki stabil nalika pH naek.
Gambar 4 Mékanisme skématik interaksi permukaan diartikeun ku agrégasi dina pH béda (baris luhur), konsentrasi NaCl (baris tengah), jeung biomolekul (baris handap).
Numutkeun Gambar 5, stabilitas koloid dina gantung AgNP tina ukuran béda ieu ogé nalungtik dina ngaronjatna konsentrasi uyah.Dumasar kana poténsi zeta, ngaronjatna ukuran nanopartikel dina sistim AgNP citrate-terminated ieu deui nyadiakeun ningkat daya tahan kana pangaruh éksternal ti NaCl.Dina AgNP-I, 10 mM NaCl cukup pikeun nyababkeun agrégasi hampang, sareng konsentrasi uyah 50 mM nyayogikeun hasil anu sami.Dina AgNP-II sareng AgNP-III, 10 mM NaCl henteu mangaruhan sacara signifikan poténsi zeta sabab nilaina tetep dina (AgNP-II) atanapi langkung handap (AgNP-III) -30 mV.Ngaronjatkeun konsentrasi NaCl kana 50 mM sarta ahirna nepi ka 150 mM NaCl cukup pikeun nyata ngurangan nilai mutlak poténsi zeta dina sakabéh sampel, sanajan partikel nu leuwih gede nahan muatan leuwih négatip.Hasil ieu konsisten jeung ekspektasi rata-rata diaméter hidrodinamika AgNPs;garis trend rata-rata Z diukur dina 10, 50, jeung 150 mM NaCl némbongkeun béda, saeutik demi saeutik ngaronjatkeun nilai.Tungtungna, agrégat ukuran micron dideteksi dina sadaya tilu percobaan 150 mM.
Gambar 5 Hasil panyebaran cahaya dinamis tina sampel nanopartikel pérak citrate-terminated kalayan ukuran ngaronjatna (10 nm: AgNP-I, 20 nm: AgNP-II jeung 50 nm: AgNP-III) dinyatakeun salaku diaméter hidrodinamik rata-rata (Z rata-rata. ) (katuhu) jeung poténsi zeta (kénca) robah dina 24 jam dina konsentrasi NaCl béda.
Hasil UV-Vis dina Gambar Suplemén S2 nunjukkeun yén SPR 50 sareng 150 mM NaCl dina sadaya tilu conto ngagaduhan panurunan anu sakedapan sareng signifikan.Ieu tiasa dijelaskeun ku DLS, sabab agrégasi dumasar-NaCl lumangsung langkung gancang tibatan ékspérimén gumantung pH, anu dijelaskeun ku bédana ageung antara pangukuran awal (0, 1,5, sareng 3 jam).Salaku tambahan, ningkatkeun konsentrasi uyah ogé bakal ningkatkeun permitivitas relatif tina médium ékspérimén, anu bakal gaduh pangaruh anu ageung dina résonansi plasmon permukaan.29
Pangaruh NaCl diringkeskeun dina jajaran tengah Gambar 4. Sacara umum, bisa dicindekkeun yén ngaronjatna konsentrasi natrium klorida boga pangaruh nu sarupa jeung ngaronjatna kaasaman, sabab ion Na+ boga kacenderungan pikeun koordinat sabudeureun gugus karboksilat, suppressing poténsi zeta AgNPs négatip.Salaku tambahan, 150 mM NaCl ngahasilkeun agrégat ukuran mikron dina sadaya tilu sampel, nunjukkeun yén konsentrasi éléktrolit fisiologis ngabahayakeun kana stabilitas koloid AgNPs sitrat-terminated.Ku tempo konsentrasi condensing kritis (CCC) tina NaCl on sistem AgNP sarupa, hasilna ieu bisa cleverly disimpen dina literatur relevan.Huynh et al.diitung yén CCC tina NaCl pikeun nanopartikel pérak citrate-terminated kalayan diaméter rata-rata 71 nm éta 47,6 mM, bari El Badawy et al.katalungtik yén CCC tina 10 nm AgNPs kalayan palapis sitrat éta 70 mM.10,16 Sajaba ti éta, anu CCC nyata luhur ngeunaan 300 mM ieu diukur ku He et al., nu ngabalukarkeun métode sintésis maranéhna pikeun jadi béda ti publikasi disebutkeun saméméhna.48 Sanajan kontribusi ayeuna teu aimed dina analisis komprehensif ngeunaan nilai ieu, sabab kaayaan eksperimen urang naek dina pajeulitna sakabéh ulikan, konsentrasi NaCl biologis relevan 50 mM, utamana 150 mM NaCl, sigana rada luhur.Ngainduksi koagulasi, ngajelaskeun parobahan kuat dideteksi.
Léngkah satuluyna dina percobaan polimérisasi nyaéta ngagunakeun molekul basajan tapi relevan sacara biologis pikeun simulasi interaksi nanopartikel-biomolekul.Dumasar DLS (Angka 6 sareng 7) sareng hasil UV-Vis (Angka Tambahan S3 sareng S4), sababaraha kacindekan umum tiasa ditegeskeun.Dina kaayaan ékspérimén, molekul glukosa sareng glutamin anu ditalungtik moal nyababkeun agrégasi dina sagala sistem AgNP, sabab trend Z-hartosna raket patalina sareng nilai pangukuran rujukan anu saluyu.Sanajan ayana henteu mangaruhan aggregation, hasil eksperimen némbongkeun yén molekul ieu sawaréh adsorbed dina beungeut AgNPs.Hasil anu paling menonjol anu ngadukung pandangan ieu nyaéta parobahan anu ditingali dina nyerep cahaya.Sanajan AgNP-I teu némbongkeun panjang gelombang bermakna atawa parobahan inténsitas, éta bisa dititénan leuwih jelas ku ngukur partikel nu leuwih gede, nu paling dipikaresep alatan sensitipitas optik nu leuwih gede disebutkeun tadi.Henteu paduli konsentrasi, glukosa tiasa nyababkeun pergeseran beureum langkung ageung saatos 1,5 jam dibandingkeun sareng pangukuran kontrol, nyaéta sakitar 40 nm dina AgNP-II sareng sakitar 10 nm dina AgNP-III, anu ngabuktikeun lumangsungna interaksi permukaan.Glutamine nunjukkeun tren anu sami, tapi parobihan éta henteu atra.Salaku tambahan, éta ogé kedah disebatkeun yén glutamin tiasa ngirangan poténsi zeta mutlak partikel sedeng sareng ageung.Sanajan kitu, ku sabab parobahan zeta ieu sigana teu mangaruhan tingkat aggregation, bisa ngaduga yén sanajan biomolekul leutik kawas glutamin bisa nyadiakeun darajat tangtu repulsion spasial antara partikel.
Gambar 6 Hasil panyebaran cahaya dinamis tina sampel nanopartikel pérak citrate-terminated kalayan ukuran ngaronjatna (10 nm: AgNP-I, 20 nm: AgNP-II jeung 50 nm: AgNP-III) dinyatakeun salaku diaméter hidrodinamik rata-rata (rata Z) (katuhu) Dina kaayaan luar tina konsentrasi glukosa anu béda, poténsi zeta (kénca) robih dina 24 jam.
Gambar 7 Hasil panyebaran cahaya dinamis tina sampel nanopartikel pérak citrate-terminated kalayan ukuran ngaronjatna (10 nm: AgNP-I, 20 nm: AgNP-II jeung 50 nm: AgNP-III) dinyatakeun salaku diaméter hidrodinamik rata-rata (Z rata-rata. ) (katuhu) Dina ayana glutamin, poténsi zeta (kénca) robah dina 24 jam.
Pondokna, biomolekul leutik kawas glukosa jeung glutamin teu mangaruhan stabilitas koloid dina konsentrasi diukur: sanajan aranjeunna mangaruhan poténsi zeta jeung hasil UV-Vis mun varying derajat, hasil rata Z henteu konsisten.Ieu nunjukkeun yén adsorption permukaan molekul nyegah repulsion éléktrostatik, tapi dina waktos anu sareng nyadiakeun stabilitas dimensi.
Dina raraga ngaitkeun hasil saméméhna jeung hasil saméméhna tur simulate kaayaan biologis leuwih skillfully, urang milih sababaraha komponén kultur sél nu paling ilahar dipake tur dipaké salaku kaayaan ékspérimén keur diajar stabilitas koloid AgNP.Dina sakabéh ékspérimén in vitro, salah sahiji fungsi pangpentingna DMEM salaku médium nyaéta pikeun netepkeun kaayaan osmotik anu diperyogikeun, tapi tina sudut pandang kimiawi, éta mangrupikeun solusi uyah kompléks kalayan kakuatan ionik total anu sami sareng 150 mM NaCl. .40 Sedengkeun pikeun FBS, éta mangrupa campuran kompléks biomolekul-utamana protéin-ti sudut pandang adsorpsi permukaan, mibanda sababaraha kamiripan jeung hasil eksperimen glukosa jeung glutamin, sanajan komposisi kimia jeung diversity Sex leuwih pajeulit.19 DLS jeung UV-Hasil katempo ditémbongkeun dina Gambar 8 jeung Gambar tambahan S5, masing-masing, bisa dipedar ku examining komposisi kimia bahan ieu sarta correlated aranjeunna kalayan ukuran dina bagian saméméhna.
Gambar 8 Hasil paburencay cahaya dinamis tina sampel nanopartikel pérak citrate-terminated kalayan ukuran ngaronjatna (10 nm: AgNP-I, 20 nm: AgNP-II jeung 50 nm: AgNP-III) dinyatakeun salaku diaméter hidrodinamik rata (Z rata-rata. ) (katuhu) Ku ayana komponén kultur sél DMEM jeung FBS, poténsi zeta (kénca) robah dina 24 jam.
Éncér AgNPs tina ukuran anu béda dina DMEM gaduh pangaruh anu sami dina stabilitas koloid sareng anu dititénan ku ayana konsentrasi NaCl anu luhur.Dispersi AgNP dina 50 v / v% DMEM nunjukkeun yén agrégasi skala ageung dideteksi ku paningkatan poténsi zeta sareng nilai Z-rata-rata sareng panurunan anu seukeut tina inténsitas SPR.Perlu dicatet yén ukuran agrégat maksimum anu diinduksi ku DMEM saatos 24 jam sabanding tibalik sareng ukuran nanopartikel primer.
Interaksi antara FBS sareng AgNP sami sareng anu dititénan ku ayana molekul anu langkung alit sapertos glukosa sareng glutamin, tapi pangaruhna langkung kuat.Z rata-rata partikel tetep teu kapangaruhan, sedengkeun paningkatan poténsi zeta dideteksi.Puncak SPR némbongkeun hiji shift beureum slight, tapi sugan leuwih metot, inténsitas SPR teu turun sakumaha nyata sakumaha dina ukuran kontrol.Hasil ieu tiasa dijelaskeun ku adsorpsi bawaan makromolekul dina permukaan nanopartikel (baris handap dina Gambar 4), anu ayeuna dipikaharti salaku formasi korona biomolekul dina awak.49