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E sili atu i taimi uma ni nanoparticles laiti?Malamalama i aafiaga olaola o le tele-faalagolago faʻatasi o nanoparticles siliva i lalo o tulaga faʻapitoa
Tusitala: Bélteky P, Rónavári A, Zakupszky D, Boka E, Igaz N, Szerencsés B, Pfeiffer I, Vágvölgyi C, Kiricsi M, Kónya Z
Péter Bélteky,1,* Andrea Rónavári,1,* Dalma Zakupszky,1 Eszter Boka,1 Nóra Igaz,2 Bettina Szerencsés,3 Ilona Pfeiffer,3 Csaba Vágvölgyi,3 Mónika Kiricsi o le Kemisi Siosiomaga, Saienisi ma Hanikeri Informatics , Iunivesite o Szeged;2 Matagaluega o Biochemistry ma Molecular Biology, Faculty of Science and Information, Iunivesite o Szeged, Hanikeri;3 Matagaluega o Microbiology, Faculty of Science and Information, Iunivesite o Szeged, Hanikeri;4MTA-SZTE Reaction Kinetics and Surface Chemistry Research Group, Szeged, Hanikeri* E tutusa le sao o nei tusitala i lenei galuega.Fesootaiga: Zoltán Kónya Matagaluega o Applied and Environment Chemistry, Faculty of Science and Informatics, University of Szeged, Rerrich Square 1, Szeged, H-6720, Hungary Telefoni +36 62 544620 Email [Imeli puipuia] Faamoemoega: Silver nanoparticles (AgNPs) e o se tasi o mea sili ona suʻesuʻeina nanomaterials, aemaise lava ona o latou talosaga biomedical.Ae ui i lea, ona o le tuufaatasiga o nanoparticles, o latou cytotoxicity sili ona lelei ma gaioiga antibacterial e masani ona faʻafefe i ala o meaola.I totonu o lenei galuega, o le faʻapipiʻiina o amioga ma gaioiga faʻapitoa faʻapitoa o faʻataʻitaʻiga nanoparticle siliva e tolu faʻamaeʻaina citrate ma le averesi o le 10, 20, ma le 50 nm sa suʻesuʻeina.Metotia: Fa'aaoga le microscope electron transmission e fa'apipi'i ma fa'ailoga nanoparticles, iloilo a latou amio fa'atasi i tulaga eseese o le pH, NaCl, glucose ma le glutamine concentrations e ala i le fa'asalalauina o le malamalama fa'amalosi ma le spectroscopy va'aia ultraviolet.E le gata i lea, i totonu o le aganuʻu aganuʻu vaega vaega e pei o Dulbecco e faʻaleleia ai le tuʻufaʻatasiga amio ile Eagle Medium ma Fetal Calf Serum.I'uga: O fa'ai'uga o lo'o fa'aalia ai o le pH acidic ma le physiological electrolyte e masani ona fa'aosoina ai le fa'aputuga o micron-scale, lea e mafai ona fa'atalanoaina e ala i le fa'atupuina o le corona biomolecular.E taua le maitauina o mea laiti tetele e faʻaalia le maualuga atu o le tetee atu i aʻafiaga mai fafo nai lo latou tamaʻi paʻaga.I vitro cytotoxicity ma su'ega antibacterial na faia e ala i le togafitia o sela i nanoparticle aggregates i vaega eseese fa'aputuga.Fa'ai'uga: O a matou fa'ai'uga e fa'aalia ai se fa'amaopoopo loloto i le va o le mautu o le colloidal ma le o'ona o le AgNPs, ona o le fa'aputuga tele e o'o atu ai i le fa'ato'a mou atu o gaioioiga olaola.O le maualuga maualuga o le anti-aggregation e matauina mo vaega tetele e iai sona aafiaga taua ile in vitro toxicity, ona o ia faʻataʻitaʻiga o loʻo taofiofia ai le tele o gaioiga faʻamaʻi ma meaola sela.O nei suʻesuʻega e taʻitaʻia ai le faʻaiuga, e ui lava i manatu lautele i tusitusiga talafeagai, o le tulimataʻiina o nanoparticles sili ona laiti atonu e le o se auala sili ona lelei.Upu autu: tuputupu aʻe fatu-faʻasalalau, mautu colloidal, amio faʻapipiʻi faʻalagolago i le tele, faʻaleagaina faʻaleagaina oona.
A'o fa'aauau pea ona fa'atupula'ia le mana'oga ma le gaosiga o nanomaterials, o lo'o fa'atupula'ia le tele ma le fa'asili atu i lo latou biosafety po'o gaioiga fa'aola.Silver nanoparticles (AgNPs) o se tasi o sui sili ona faʻapipiʻiina, suʻesuʻeina ma faʻaaogaina o lenei vasega o meafaitino ona o lo latou sili ona lelei catalytic, optical ma biological properties.1 E masani ona talitonuina o uiga tulaga ese o nanomaterials (e aofia ai AgNPs) e masani lava ona mafua mai i la latou vaega tele o luga.O le mea lea, o le faʻafitauli mautinoa o soʻo se faʻagasologa e aʻafia ai lenei vaega autu, e pei o le lapopoa, faʻapipiʻi luga Poʻo le faʻapipiʻiina, pe o le a matua faʻaleagaina ai meatotino o nanoparticles e taua i faʻaoga faʻapitoa.
O a'afiaga o le lapopo'a ma mea fa'amautu o mataupu ia na fa'amauina lelei i tusitusiga.Mo se fa'ata'ita'iga, o le va'aiga masani e fa'apea e sili atu ona oona nai nanoparticles laiti nai lo nanoparticles tetele.2 E ogatasi ma tusitusiga lautele, oa matou suʻesuʻega talu ai na faʻaalia ai le tele-faʻalagolago i gaioiga o le nanosilver i luga o sela mamame ma microorganisms.3- 5 O le faʻapipiʻiina o luga o le isi uiga e iai sona aafiaga lautele i mea totino o meafaitino.Na'o le fa'aopoopoina po'o le fa'aleleia o mea fa'amautu i luga, o le nanomaterial lava e tasi atonu e matua'i 'ese'ese mea fa'aletino, vaila'au, ma mea ola.O le faʻaogaina o mea faʻapipiʻi e masani ona faia o se vaega o le nanoparticle synthesis.Mo se faʻataʻitaʻiga, citrate-terminated silver nanoparticles o se tasi lea o AgNPs sili ona talafeagai i le suʻesuʻega, lea e faʻapipiʻiina e ala i le faʻaitiitia o masima siliva i totonu o se vaifofo faʻamautu filifilia e avea ma auala faʻaalia.6 Citrate e mafai ona faigofie ona faʻaaogaina lona tau maualalo, avanoa, biocompatibility, ma le malosi faʻatasi mo le siliva, lea e mafai ona atagia i fegalegaleaiga faʻatulagaina eseese, mai le faʻafeiloaʻi o luga o le eleele e mafai ona faʻafeiloaʻi i fegalegaleaiga ionic.Laiti molecules ma polyatomic ions latalata 7,8, e pei o citrates, polymers, polyelectrolytes, ma sui o meaola e masani foi ona faʻaaogaina e faʻamautu ai le nano-silver ma faʻatino galuega faʻapitoa i luga.9-12
E ui lava o le avanoa e suia ai le gaioiga o nanoparticles e ala i le faʻaogaina o le faʻapipiʻi luga o se nofoaga e sili ona manaia, o le matafaioi autu o lenei faʻapipiʻi luga e faʻatauvaʻa, e maua ai le mautu colloidal mo le nanoparticle system.Ole tele ole vaega ole nanomaterial o le a maua ai le malosi tele, lea e faʻalavelaveina ai le malosi o le thermodynamic ole faiga e oʻo atu ai i lona malosi maualalo.13 A aunoa ma le faʻamautuina lelei, e mafai ona taʻitaʻia ai le faʻapipiʻiina o nanomaterials.O le fa'aputuga o le fa'atupuina lea o fa'aputuga o vaega 'ese'ese o foliga ma lapopo'a e tupu pe a fa'afeiloa'i vaega ta'ape ma feso'ota'iga thermodynamic o lo'o i ai nei e mafai ai ona pipii atu vaega.O le mea lea, e fa'aogaina mea fa'amautu e puipuia ai fa'aputuga e ala i le fa'aofiina o se malosi fa'afefete tele i le va o vaega e fa'afete'ena'i ai lo latou tosoina o le thermodynamic.14
E ui lava ina su'esu'eina mae'ae'a le mataupu ole lapo'a ma le fa'apipi'i i luga ole fa'atonuga o gaioiga fa'aola e fa'aosoina e nanoparticles, ole fa'aputuga fa'ameamea o se vaega tele e le amana'ia.E toetoe lava leai se suʻesuʻega maeʻaeʻa e foia ai le mautu colloidal o nanoparticles i lalo ole tulaga faʻapitoa.10,15-17 E le gata i lea, o lenei saofaga e seasea lava, pe a fai o le oona e fesootaʻi ma le faʻapipiʻiina na suʻesuʻeina foi, e tusa lava pe mafai ona mafua ai ni faʻalavelave leaga, e pei o le vascular thrombosis, poʻo le leiloa o uiga manaʻomia, e pei o lona oona, pei o. faʻaalia i le Ata 1.18, 19 faʻaalia.O le mea moni, o se tasi o nai faiga lauiloa o le tetee nanoparticle siliva e fesoʻotaʻi ma le faʻapipiʻiina, ona o nisi E. coli ma Pseudomonas aeruginosa strains ua lipotia mai e faʻaitiitia ai lo latou nano-silver sensitivity e ala i le faʻaalia o le protein flagellin, flagellin.E i ai se sootaga maualuga mo le siliva, lea e faaosofia ai le tuufaatasiga.20
E tele auala eseese e fesoʻotaʻi ma le oona o nanoparticles siliva, ma faʻapipiʻi e aʻafia ai nei faiga uma.O le auala sili ona talanoaina o le AgNP biological activity, o nisi taimi e taʻua o le "Trojan Horse", e faʻatatau ia AgNPs e pei o Ag + carriers.1,21 O le masini solofanua Trojan e mafai ona faʻamautinoaina se faʻaopoopoga tele i le faʻaogaina o le Ag + i le lotoifale, lea e oʻo atu ai i le faʻatupuina o le ROS ma le membrane depolarization.22-24 O le fa'aputuga e mafai ona a'afia ai le fa'asa'olotoina o le Ag+, ma fa'apea ona a'afia ai le oona, aua e fa'aitiitia ai le fa'aogaina lelei o le mea e mafai ai ona fa'ama'i ma fa'amavae iona siliva.Ae ui i lea, o AgNPs o le a le gata ina faʻaalia le oona e ala i le tuʻuina atu o ion.E tatau ona iloiloina le tele o fegalegaleaiga e feso'ota'i ma morphology.Faatasi ai ma i latou, o le tele ma foliga o le nanoparticle surface o uiga faʻamalamalamaina.4,25 O le aoina o nei masini e mafai ona faʻavasegaina o "mea faʻaosoina oona."E ono iai le tele o tali mitochondrial ma luga o le membrane e mafai ona faʻaleagaina ai totoga ma mafua ai le oti o sela.25-27 Talu ai ona o le faʻavaeina o faʻapotopotoga e masani ona aʻafia ai le lapopoa ma foliga o mea o loʻo i ai siliva e iloa e faiga ola, e mafai foi ona aʻafia nei fegalegaleaiga.
I la matou pepa muamua i luga o le tuufaatasiga o nanoparticles siliva, matou faʻaalia se faiga suʻesuʻe lelei e aofia ai vailaʻau ma in vitro faʻataʻitaʻiga o meaola e suʻesuʻe ai lenei faʻafitauli.19 Dynamic Light Scattering (DLS) o le auala sili lea mo nei ituaiga o asiasiga ona o mea e mafai ona faʻasalalau photons i se umi galu e tutusa ma le tele o ona vaega.Talu ai ona o le saoasaoa o le Brownian motion o vaega i totonu o le suavai e fesoʻotaʻi ma le tele, o le suiga i le malosi o le malamalama faʻasalalau e mafai ona faʻaaogaina e fuafua ai le averesi hydrodynamic diameter (Z-mean) o le faʻataʻitaʻiga vai.28 E le gata i lea, e ala i le faʻaogaina o le voltage i le faʻataʻitaʻiga, o le zeta gafatia (ζ potential) o le nanoparticle e mafai ona fua tutusa ma le tau masani Z.13,28 Afai e lava le maualuga o le tau atoatoa o le zeta gafatia (e tusa ai ma taʻiala lautele> ± 30 mV), o le a faʻatupuina ai le malosi o le electrostatic repulsion i le va o vaega e faʻafefe ai le faʻapipiʻiina.O uiga mata'ina plasmon resonance (SPR) o se mea mataʻina tulaga ese, e masani ona mafua mai i nanoparticles uʻamea taua (tele Au ma Ag).29 E faʻavae i luga ole faʻaeletonika faʻaeletonika (plasmons luga) o nei mea i luga ole nanoscale, e iloa ai o AgNP spherical o loʻo i ai se uiga maualuga o le faʻaogaina o le UV-Vis latalata ile 400 nm.30 O le malosi ma le umi o le galu o mea e faʻaaogaina e faʻaopoopo i taunuuga o le DLS, ona o lenei metotia e mafai ona faʻaogaina e iloa ai le faʻapipiʻiina o le nanoparticle ma le faʻaogaina o luga ole biomolecules.
Faʻavae i luga o faʻamatalaga na maua mai, o le faʻaogaina o le cell viability (MTT) ma suʻega antibacterial o loʻo faia i se auala e faʻamatalaina ai le faʻamaʻi o le AgNP o se galuega o le faʻapipiʻiina o le maualuga, nai lo (le mea e masani ona faʻaaogaina) nanoparticle concentration.O lenei metotia tulaga ese e mafai ai ona tatou faʻaalia le taua tele o le faʻapipiʻiina o tulaga i gaioiga faʻaola, aua, mo se faʻataʻitaʻiga, citrate-terminated AgNPs atoa le leiloa a latou gaioiga olaola i totonu o ni nai itula ona o le faʻapipiʻiina.19
I le galuega o loʻo i ai nei, matou te faʻamoemoe e faʻalauteleina a matou sao muamua i le mautu o colloids e fesoʻotaʻi ma meaola ma o latou aʻafiaga i gaioiga faʻaola e ala i le suʻesuʻeina o le aʻafiaga o le tele o le nanoparticle i luga o le nanoparticle aggregation.E le masalomia o se tasi lea o suʻesuʻega o nanoparticles.O se vaaiga maualuga ma le 31 Ina ia suʻesuʻeina lenei mataupu, na faʻaaogaina ai se auala faʻalauteleina o fatu e gaosia ai AgNPs faʻamuta citrate i vaega eseese e tolu (10, 20, ma le 50 nm).6,32 o se tasi o auala sili ona taatele.Mo nanomaterials e lautele ma masani ona faʻaaogaina i talosaga faafomaʻi, citrate-terminated AgNPs o lapopoʻa eseese e filifilia e suʻesuʻe ai le tele o le faʻalagolago i le faʻapipiʻiina o mea olaola o le nanosilver.Ina ua maeʻa le faʻapipiʻiina o AgNP o lapopoa eseese, matou te faʻavasegaina faʻataʻitaʻiga na gaosia e ala i le tuʻuina atu o le electron microscopy (TEM), ona suʻesuʻeina lea o vaega e faʻaaoga ai le faiga o suʻesuʻega.E le gata i lea, i le i ai o aganuʻu i vitro o le Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) ma le Fetal Bovine Serum (FBS), o le tele-faʻalagolago i amioga faʻapipiʻi ma ana amio na iloiloina i tulaga eseese o le pH, NaCl, glucose, ma le glutamine concentrations.O uiga o le cytotoxicity e fuafuaina i lalo o tulaga atoatoa.O le maliega faʻasaienisi o loʻo faʻaalia ai i se tulaga lautele, o vaega laiti e sili atu;o la matou su'esu'ega e maua ai se vaila'au ma mea ola e iloa ai pe o le tulaga lea.
E tolu nanoparticles siliva e eseese le tele o laina na saunia e le fatu-mediated auala tuputupu aʻe na fuafuaina e Wan et al., Faʻatasi ai ma sina fetuunaiga.6 O lenei metotia e faʻavae i luga o le faʻaitiitiga o vailaʻau, faʻaaogaina le nitrate siliva (AgNO3) e fai ma puna siliva, sodium borohydride (NaBH4) e fai ma sui faʻaitiitia, ma le sodium citrate e fai ma faʻamautu.Muamua, saunia le 75 mL o le 9 mM citrate aqueous solution mai le sodium citrate dihydrate (Na3C6H5O7 x 2H2O) ma vevela i le 70°C.Ona faaopoopo lea o le 2 mL o le 1% w/v AgNO3 solution i le auala e tali atu ai, ona sasaa atu lea o le vaifofo fou o le sodium borohydride (2 mL 0.1% w/v) i totonu o le paluga matāua.O le mea na maua mai le samasama-lanu enaena taofi taofi i le 70 ° C ma faʻamalosi malosi mo le 1 itula, ona faʻamalieina lea i le vevela potu.O le faʻataʻitaʻiga faʻataʻitaʻiga (ua taʻua o AgNP-I mai le taimi nei) e faʻaaogaina e fai ma faʻavae mo le tuputupu aʻe o fatu i le isi laasaga faʻapipiʻi.
Ina ia faʻapipiʻiina se faʻalavelave faʻapitoa (faʻailogaina o le AgNP-II), vevela 90 mL 7.6 mM citrate solution i le 80 ° C, faʻafefiloi ma le 10 mL AgNP-I, ona faʻafefiloi lea 2 mL 1% w / v O le AgNO3 solution. sa teuina i lalo o le fa'aoso malosi fa'ainisinia mo le 1 itula, ona fa'amalieina lea o le fa'ata'ita'iga i le vevela potu.
Mo le vaega tele (AgNP-III), toe fai le faagasologa o le tuputupu aʻe tutusa, ae i lenei tulaga, faʻaaoga le 10 mL o AgNP-II e pei o le faʻamalolo o fatu.A maeʻa faʻataʻitaʻiga e oʻo atu i le vevela o le potu, latou te setiina a latou numera Ag faʻavae i luga o le aofaʻi o AgNO3 i le 150 ppm e ala i le faʻaopoopoina poʻo le faʻafefe o le solvent faaopoopo i le 40 ° C, ma mulimuli ane teuina i le 4 ° C seia oʻo ina faʻaaoga.
Fa'aaogā le FEI Tecnai G2 20 X-Twin Transmission Electron Microscope (TEM) (FEI Corporate Headquarters, Hillsboro, Oregon, ISA) fa'atasi ai ma le 200 kV fa'avavevave voltage e su'esu'e ai uiga morphological o nanoparticles ma pu'eina a latou fa'asologa o le electron diffraction (ED).E le itiiti ifo ma le 15 faʻatusa ata (~ 750 vaega) na iloiloina e faʻaaoga ai le ImageJ software package, ma o faʻasologa o histograms (ma kalafi uma i le suʻesuʻega atoa) na faia ile OriginPro 2018 (OriginLab, Northampton, MA, USA) 33, 34.
O le averesi hydrodynamic diameter (Z-average), zeta gafatia (ζ-potential) ma uiga i luga ole plasmon resonance (SPR) o faʻataʻitaʻiga na fuaina e faʻaalia ai a latou mea muamua colloidal.O le averesi hydrodynamic diameter ma zeta gafatia o le faataitaiga na fuaina e le Malvern Zetasizer Nano ZS meafaifaaili (Malvern Instruments, Malvern, UK) faʻaaogaina sela capillary gaugau lafoaʻi i 37±0.1°C.Ocean Optics 355 DH-2000-BAL UV-Vis spectrophotometer (Halma PLC, Largo, FL, ISA) na faʻaaogaina e maua ai uiga faʻapitoa SPR mai le UV-Vis absorption spectra o faʻataʻitaʻiga i le va o 250-800 nm.
I le taimi o le suʻega atoa, e tolu ituaiga fua faʻatatau e fesoʻotaʻi ma le mautu colloidal na faia i le taimi e tasi.Fa'aaoga le DLS e fua ai le averesi hydrodynamic diameter (Z averesi) ma le zeta gafatia (ζ gafatia) o vaega, aua o le averesi Z e fesootai ma le tele o le nanoparticle aggregates, ma o le zeta gafatia e faailoa ai pe o le electrostatic repulsion i le faiga. e lava le malosi e fa'afefe ai Van der Waals tosina i le va o nanoparticles.E faia fua fa'atolu, ma o le va'aiga masani o le Z mean ma le zeta gafatia e fuafuaina e le Zetasizer software.Ole uiga ole SPR ole spectra ole vaega ole vaega ole su'esu'eina ole UV-Vis spectroscopy, aua o suiga ile maualuga ole malosi ma le umi ole galu e mafai ona faʻaalia ai le faʻapipiʻiina ma fegalegaleaiga luga.29,35 O le mea moni, o le plasmon resonance i luga o le plasmon i uʻamea taua e matua aʻafia ai lea na taʻitaʻia ai auala fou o suʻesuʻega o biomolecules.29,36,37 O le faʻaogaina o AgNPs i le faʻafefiloi faʻataʻitaʻiga e tusa ma le 10 ppm, ma o le faʻamoemoe o le setiina o le malosi o le maualuga o le SPR muamua muamua i le 1. O le suʻega na faia i se taimi faʻalagolago i le 0;1.5;3;6;12 ma le 24 itula i lalo o tulaga eseese fa'alesoifua maloloina.O nisi fa'amatalaga e fa'amatala ai le fa'ata'ita'iga e mafai ona va'aia i la matou galuega talu ai.19 I se faapuupuuga, o tulaga eseese o le pH (3; 5; 7.2 ma le 9), eseese sodium chloride (10 mM; 50 mM; 150 mM), kulukose (3.9 mM; 6.7 mM) ma le glutamine (4 mM), ma na saunia foi Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) ma Fetal Bovine Serum (FBS) (i le vai ma le DMEM) e fai ma faʻataʻitaʻiga faiga, ma suʻesuʻeina o latou aafiaga i luga o le amio faʻapipiʻi o nanoparticles siliva synthesized.pH O tau o, NaCl, glucose, ma le glutamine e iloiloina e faʻatatau i faʻatonuga o le tino, ae o le aofaʻi o le DMEM ma le FBS e tutusa ma le maualuga o loʻo faʻaaogaina i le suʻega in vitro atoa.38-42 O fua uma na faia i le pH 7.2 ma le 37°C faatasi ai ma le masima tumau o le 10 mM NaCl e faʻaumatia ai soʻo se fegalegaleaiga mamao mamao (sei vagana ai ni faʻataʻitaʻiga o le pH ma le NaCl, lea o nei uiga o fesuiaiga i lalo. suʻesuʻega).28 O le lisi o tulaga eseese o loʻo aoteleina i le Laulau 1. O le faʻataʻitaʻiga ua faʻailogaina i le † e faʻaaogaina e fai ma faʻamatalaga ma fetaui ma se faʻataʻitaʻiga o loʻo i ai le 10 mM NaCl ma le pH 7.2.
Laina sela sela o le kanesa prostate tagata (DU145) ma keratinocytes tagata ola pea (HaCaT) na maua mai le ATCC (Manassas, VA, ISA).O sela e masani ona faʻatupuina i Dulbecco's minimum essential medium Eagle (DMEM) o loʻo i ai le 4.5 g / L kulukose (Sigma-Aldrich, Saint Louis, MO, ISA), faʻaopoopo i le 10% FBS, 2 mM L-glutamine, 0.01 % Streptomycin ma 0.005% Penicillin (Sigma-Aldrich, St. Louis, Misuri, ISA).O sela o loʻo faʻatupuina ile 37 ° C incubator i lalo ole 5% CO2 ma le 95% susu.
Ina ia mafai ona suʻesuʻeina suiga i le AgNP cytotoxicity e mafua mai i le faʻapipiʻiina o vaega i se taimi faʻalagolago, na faia ai se suʻega MTT e lua-laasaga.Muamua, o le gafatia o ituaiga sela e lua na fuaina pe a uma togafitiga ma AgNP-I, AgNP-II ma AgNP-III.I lenei tulaga, o ituaiga e lua o sela na totoina i totonu o le 96-well plates i le mamafa o le 10,000 sela / vaieli ma togafitia i ni lapopoa eseese se tolu o nanoparticles siliva i le faateleina o le maualuga i le aso lona lua.A maeʻa le 24 itula o togafitiga, na fufuluina sela i le PBS ma faʻapipiʻiina i le 0.5 mg / mL MTT reagent (SERVA, Heidelberg, Siamani) faʻafefe i le aganuu mo le 1 itula i le 37 ° C.O tioata Formazan na solo i DMSO (Sigma-Aldrich, Saint Louis, MO, ISA), ma o le absorption na fuaina i le 570 nm e faʻaaoga ai le Synergy HTX plate reader (BioTek-Hungary, Budapest, Hungary).Ole aoga ole absorption ole fa'ata'ita'iga fa'atonutonu e le'i togafitia e manatu e 100% fua faatatau ola.Fa'atino ni fa'ata'ita'iga pe a ma le 3 e fa'aaoga ai fa'atusa fa'ale-natura tuto'atasi.Ole IC50 e fa'atatau ile fua ole tali ole fua ole fua fa'atatau ile fua ole malosi.
Mulimuli ane, i le laasaga lona lua, e ala i le faʻapipiʻiina o vaega i le 150 mM NaCl mo taimi eseese (0, 1.5, 3, 6, 12, ma 24 itula) aʻo leʻi faia togafitiga faʻasolosolo, na gaosia ai tulaga faʻapipiʻi eseese o nanoparticles siliva.Mulimuli ane, o le suʻega MTT lava e tasi na faia e pei ona faʻamatalaina muamua e iloilo ai suiga i le gafatia o le cell na aʻafia i le faʻapipiʻiina o mea.Fa'aaoga le GraphPad Prism 7 e iloilo ai le fa'ai'uga mulimuli, fa'atatau le taua fa'afuainumera o le fa'ata'ita'iga e ala i le su'ega t e le'i fa'aluaina, ma fa'ailoga lona tulaga o le * (p ≤ 0.05), ** (p ≤ 0.01), *** (p ≤ 0.001 ) Ma **** (p ≤ 0.0001).
E tolu ituaiga eseese o nanoparticles siliva (AgNP-I, AgNP-II ma AgNP-III) na faʻaaogaina mo le faʻamaʻiina o le antibacterial i Cryptococcus neoformans IFM 5844 (IFM; Nofoaga Suʻesuʻe mo le Pathogenic Fungi ma Microbial Toxicology, Chiba University) ma le Bacillus Test megaterium SZMC 6031 (SZMC: Szeged Microbiology Collection) ma E. coli SZMC 0582 i le RPMI 1640 medium (Sigma-Aldrich Co.).Ina ia mafai ona iloilo suiga i le gaioiga o le antibacterial e mafua mai i le faʻapipiʻiina o vaega, muamua, o latou laʻititi faʻalavelave faʻalavelave (MIC) na fuafuaina e le microdilution i totonu o le 96-well microtiter plate.I le 50 μL o le faʻaogaina o le faʻaogaina o le cell (5 × 104 sela / mL i le RPMI 1640 medium), faʻaopoopo le 50 μL o le nanoparticle suspension siliva ma faʻafefe faalua le faʻatonuga (i le auala ua taʻua muamua, o le 0 ma le 75 ppm, o lona uiga, o le faʻataʻitaʻiga faʻataʻitaʻiga o loʻo i ai le 50 μL o le faʻaogaina o le cell ma le 50 μL o le medium e aunoa ma ni nanoparticles).Mulimuli ane, na faʻapipiʻiina le ipu i le 30 ° C mo 48 itula, ma o le maualuga o le aganuʻu na fuaina i le 620 nm e faʻaaoga ai le SPECTROstar Nano plate reader (BMG LabTech, Offenburg, Siamani).Sa fa'atolu ona faia le fa'ata'ita'iga i fa'atolu.
Vagana ai o le 50 μL o faʻataʻitaʻiga nanoparticle faʻapipiʻi tasi na faʻaaogaina i le taimi nei, o le faiga lava lea e tasi e pei ona faʻamatalaina muamua na faʻaaogaina e suʻesuʻe ai le aʻafiaga o le faʻapipiʻiina i luga o gaioiga antibacterial i luga o faʻalavelave ua taʻua muamua.O tulaga faʻapipiʻi eseese o nanoparticles siliva e gaosia e ala i le faʻapipiʻiina o vaega i le 150 mM NaCl mo taimi eseese (0, 1.5, 3, 6, 12, ma 24 itula) aʻo leʻi faʻaogaina le cell.O se faʻamalologa faʻaopoopoina ma le 50 μL o le RPMI 1640 medium na faʻaaogaina e avea o se faʻaleleia o le tuputupu aʻe, ae ina ia mafai ona pulea le oona, o se faʻamalologa faʻatasi ma nanoparticles e le faʻapipiʻiina.Sa fa'atolu ona faia le fa'ata'ita'iga i fa'atolu.Fa'aaoga le GraphPad Prism 7 e toe iloilo ai le fa'ai'uga mulimuli, fa'aaoga le su'esu'ega fa'afuainumera tutusa ma le su'esu'ega MTT.
O le tulaga faʻapipiʻi o vaega laiti (AgNP-I) ua faʻaalia, ma o faʻaiʻuga na faʻasalalau vaega i la matou galuega talu ai, ae mo se faʻatusatusaga sili atu, o vaega uma na vaʻaia maeʻaeʻa.O faʻamatalaga faʻataʻitaʻiga e aoina ma talanoaina i vaega o loʻo mulimuli mai.Tolu lapopoa o AgNP.19
Fua na faia e TEM, UV-Vis ma DLS faʻamaonia le faʻaogaina manuia o faʻataʻitaʻiga uma a AgNP (Ata 2A-D).E tusa ai ma le laina muamua o le Ata 2, o le vaega pito itiiti (AgNP-I) o loʻo faʻaalia ai se morphology spherical toniga ma le averesi lautele o le 10 nm.Ole auala ole tuputupu aʻe o fatu e maua ai foʻi le AgNP-II ma le AgNP-III faʻatasi ai ma le lapopoa eseese ma le averesi o le lautele ole 20 nm ma le 50 nm, i le faasologa.E tusa ai ma le faʻasologa masani o le tufatufaina atu o vaega, o le tele o faʻataʻitaʻiga e tolu e le faʻafefe, lea e taua mo a latou suʻesuʻega faʻatusatusa.I le fa'atusatusaina o le fua fa'atatau ma le manifinifi o fa'ata'ita'iga 2D fa'avae TEM, ua manatu ai o le sphericity o vaega e iloilo e le ImageJ's shape filter plug-in (Ata 2E).43 E tusa ai ma le auʻiliʻiliga o foliga o vaega, o latou fua faʻatatau (itu lapoʻa / itu puʻupuʻu o le pito sili ona laʻititi laʻititi) e le aʻafia i le tuputupu aʻe o mea laiti, ma o latou fua manifinifi (fuafuaina o le liʻo atoatoa talafeagai / vaega faʻapitoa. ) ua faasolosolo ona faaitiitia.O le mea lea e maua ai le tele ma sili atu o vaega polyhedral, lea e atoatoa le lapotopoto i le talitonuga, e fetaui ma se fua faatatau manifinifi o le 1.
Ata 2 Fa'aliliuina o le microscope electron (TEM) ata (A), fa'asologa o le electron diffraction (ED) pattern (B), histogram tufatufa lapopo'a (C), alaleo miti absorption malamalama (D), uiga fa'aalia o le ultraviolet-visible (UV-Vis), ma le vai averesi Citrate -terminated nanoparticles silver with mechanical diameter (Z-average), zeta potential, aspect ratio ma mafiafia fua faatatau (E) e tolu ituaiga eseese tele: AgNP-I o le 10 nm (laina pito i luga), AgNP -II o 20 nm (laina ogatotonu. ), AgNP-III (laina pito i lalo) e 50 nm.
E ui lava o le natura faʻataʻamilomilo o le auala tuputupu aʻe na aʻafia ai le foliga o meameamea i se vaega, e mafua ai le laʻititi laʻititi o AgNPs tetele, o faʻataʻitaʻiga uma e tolu na tumau pea i le quasi-spherical.E le gata i lea, e pei ona faʻaalia i le faʻasologa o le electron diffraction i le Ata 2B, nano E le aʻafia le tioata o vaega.O le mama o le eseesega iloga-lea e mafai ona fa'amaopoopoina ma le (111), (220), (200), ma le (311) Miller fa'ailoga o le ario-e matua ogatusa ma tusitusiga faasaienisi ma a tatou sao muamua.9, 19,44 O le vaevaega o le Debye-Scherrer mama o AgNP-II ma AgNP-III e mafua mai i le mea moni o le ata ED o loʻo puʻeina i le faʻalauteleina lava e tasi, ina ia faʻateleina le tele o le vaega, o le numera o mea faʻapitoa i le tasi. fa'ateleina ma fa'aitiitia le ea o le iunite .
Ole tele ma foliga ole nanoparticles ua iloa e a'afia ai gaioiga olaola.3,45 Faʻavae faʻalagolago i le catalytic ma le biological activity e mafai ona faʻamatalaina e le mea moni o foliga eseese e masani ona faʻateleina foliga tioata (e iai faʻailoga Miller eseese), ma o nei foliga tioata e eseese gaioiga.45,46 Talu ai ona o mea'ai saunia e maua ai tali tutusa a le ED e tutusa ma uiga tioata tutusa, e mafai ona manatu e faapea i la tatou suʻesuʻega faʻamautu colloidal ma meaola faʻataʻitaʻiga, soʻo se eseesega mataʻituina e tatau ona faʻatatau i le Nanoparticle tele, ae le o mea e faʻatatau i foliga.
O faʻaiʻuga o le UV-Vis o loʻo aoteleina i le Ata 2D o loʻo faʻamamafaina atili ai le natura spherical lofituina o le AgNP faʻapipiʻiina, ona o le maualuga o le SPR o faʻataʻitaʻiga uma e tolu e lata i le 400 nm, o se uiga taua o nanoparticles siliva spherical.29,30 O le va'aiga pu'eina na fa'amaonia ai fo'i le manuia o le tuputupu a'e o le nanosilver.Aʻo faʻatuputeleina le tele o le vaega, o le umi o le galu e fetaui ma le maualuga o le malamalama o le malamalama o AgNP-II-sili atu ona iloga-E tusa ai ma tusitusiga, AgNP-III Na oʻo i se lanu mumu.6,29
E tusa ai ma le amataga colloidal mautu o le AgNP faiga, DLS sa faaaoga e fua le averesi hydrodynamic diameter ma zeta gafatia o vaega i le pH 7.2.O faʻaiʻuga o loʻo faʻaalia i le Ata 2E o loʻo faʻaalia ai o le AgNP-III e maualuga atu le colloidal stability nai lo le AgNP-I poʻo le AgNP-II, aua o taʻiala masani o loʻo faʻaalia ai o le zeta gafatia o le 30 mV atoatoa e manaʻomia mo le tumau o le colloidal tumau. ole tau ole Z (maua o le averesi hydrodynamic diameter o vaega saoloto ma faʻapipiʻi) e faʻatusatusa i le lapoʻa muamua na maua e le TEM, aua o le vavalalata o tau e lua, o le faʻaitiitia o le tikeri Faʻapotopoto i le faʻataʻitaʻiga.O le mea moni, o le Z averesi o AgNP-I ma AgNP-II e sili atu le maualuga nai lo le tele o le tele o le TEM-evaluated, pe a faʻatusatusa i le AgNP-III, o nei faʻataʻitaʻiga o loʻo valoia o le a sili atu ona faʻapipiʻiina, pe a sili atu le leaga o le zeta. o lo'o fa'atasi ma se lapo'a vavalalata O le tau masani a Z.
O faʻamatalaga mo lenei faʻalavelave e mafai ona lua.I le tasi itu, o le maualuga o le citrate o loʻo tumau pea i se tulaga tutusa i laʻasaga faʻapipiʻi uma, e tuʻuina atu ai se aofaʻiga maualuga o vaega faʻapipiʻi e taofia ai le faʻaititia o le vaega faʻapitoa o le tuputupu aʻe.Ae ui i lea, e tusa ai ma le Levak et al., o mea laiti laiti e pei o le citrate e mafai ona faigofie ona fesuiaʻi e biomolecules i luga o le nanoparticles.I lenei tulaga, o le colloidal mautu o le a fuafuaina e le korona o biomolecules gaosia.31 Talu ai o lenei amioga sa matauina foi i a matou fua faʻatasi (talanoaina atili auiliili mulimuli ane), e le mafai ona faʻamatalaina e le citrate capping naʻo ia lenei mea.
I le isi itu, o le lapopo'a o le vaega e fa'afeagai ma le fa'aputuga fa'aopoopo i le nanometer.O lenei mea e masani ona lagolagoina e le masani a Derjaguin-Landau-Verwey-Overbeek (DLVO), lea o loʻo faʻamatalaina ai le tosoina o vaega o le aofaʻi o malosiaga faatosina ma le faʻafefe i le va o vaega.E tusa ai ma He et al., O le maualuga o le tau o le malosi o le DLVO e faʻaitiitia i le tele o nanoparticles i le hematite nanoparticles, faʻafaigofie ona oʻo i le malosi muamua, ma faʻateleina ai le faʻamaopoopoina e le mafai ona faʻaaogaina (condensation).47 Peita'i, o lo'o fa'apea o lo'o i ai isi itu i tua atu o tapula'a ole a'oa'oga a le DLVO.E ui lava o van der Waals kalave ma electrostatic double-layer repulsion e tutusa ma le faateleina o le lapopoa, o se iloiloga a Hotze et al.o lo'o fa'ailoa mai e sili atu lona a'afiaga i fa'apotopotoga nai lo le fa'atagaina e le DLVO.14 Latou te talitonu e le mafai ona toe fa'atatauina le pupuni o luga o nanoparticles o se mea mafolafola, ua le mafai ai ona fa'aogaina le fua fa'atatau o le matematika.E le gata i lea, a'o fa'aitiitia le lapopo'a, o le pasene o atoms o lo'o i luga o le fogaeleele e sili atu ona maualuga, e o'o atu ai i le fausaga fa'aeletoroni ma amioga tau le luga.Ma suiga i luga ole gaioioiga, lea e mafai ona taitai atu ai i le faaitiitia o le tau i le eletise lua layer ma siitia le tuufaatasiga.
Pe a faʻatusatusa iʻuga DLS o AgNP-I, AgNP-II, ma AgNP-III i le Ata 3, na matou matauina o faʻataʻitaʻiga uma e tolu na faʻaalia tutusa le pH faʻamalosia faʻatasi.O le si'osi'omaga malosi (pH 3) e suia ai le malosi o le zeta o le fa'ata'ita'iga i le 0 mV, ma mafua ai ona fa'atupuina fa'aputuga micron-size, a'o le pH alkaline e suia lona malosi ole zeta i se tau leaga tele, lea e fa'atupu ai mea laiti fa'atasi (pH 5). ).Ma le 7.2) ), pe tumau pea le fa'amaopoopoina (pH 9).Sa matauina foi nisi o eseesega taua i le va o faataitaiga eseese.I le taimi atoa o le faʻataʻitaʻiga, na faʻamaonia ai le AgNP-I e sili ona maaleale i suiga o le pH-induced zeta, ona o le malosi o le zeta o nei vaega ua faʻaititia i le pH 7.2 faʻatusatusa i le pH 9, ae na o le AgNP-II ma AgNP-III na faʻaalia A. suiga tele i le ζ o loʻo i le pH 3. E le gata i lea, na faʻaalia ai e le AgNP-II le faʻagesegese o suiga ma le agavaʻa o le zeta, aʻo le AgNP-III na faʻaalia le amio sili ona agamalu o le tolu, ona o le faiga na faʻaalia ai le maualuga maualuga o le zeta ma le faʻagesegese o gaioiga, e faʻaalia ai. AgNP-III E sili ona tetee i le faʻapipiʻiina o le pH.O nei fa'ai'uga o lo'o o gatasi ma le fua fa'atatau o le lautele o le hydrodynamic.Mafaufau i le lapopoa o latou mea muamua, na faʻaalia ai e le AgNP-I le faʻapipiʻi faifaipea faifaipea i tulaga uma o le pH, e foliga mai ona o le 10 mM NaCl, ae na o le AgNP-II ma le AgNP-III na faʻaalia i le pH 3 O le aoina.O le eseesega sili ona manaia e faapea e ui lava i le tele o le nanoparticle tele, AgNP-III o loʻo faʻapipiʻiina le laʻititi laʻititi i le pH 3 i le 24 itula, e faʻamaonia ai ana mea faʻapipiʻi.E ala i le vaevaeina o le averesi Z o AgNPs i le pH 3 pe a uma le 24 itula i le tau o le faʻataʻitaʻiga ua saunia, e mafai ona matauina o le aofaʻi o le aofaʻi o AgNP-I ma AgNP-II ua faʻateleina e 50 taimi, 42 taimi, ma 22 taimi. , ta'itasi.III.
Ata 3 O le malosi o le faʻataʻapeʻapeina o le malamalama o faʻataʻitaʻiga o le citrate-terminated silver nanoparticles sample ma le faʻateleina o le tele (10 nm: AgNP-I, 20 nm: AgNP-II ma 50 nm: AgNP-III) o loʻo faʻaalia o le averesi hydrodynamic diameter (Z averesi. ) (taumatau) I lalo o tulaga eseese pH, o le zeta gafatia (agavale) suia i totonu ole 24 itula.
O le matauina o le pH-faʻalagolago faʻatasi na aʻafia ai foi le uiga o le plasmon resonance (SPR) o faʻataʻitaʻiga AgNP, e pei ona faʻamaonia e latou UV-Vis spectra.E tusa ai ma le Faʻamatalaga Faʻaopoopo S1, o le tuʻufaʻatasia o faʻamalologa nanoparticle siliva uma e tolu e sosoʻo ma le faʻaitiitia o le malosi o latou pito i luga ole SPR ma se suiga lanu mumu.O le tele o nei suiga o se galuega a le pH e ogatasi ma le tikeri o le faʻapipiʻiina o loʻo valoia e le DLS iʻuga, ae ui i lea, o nisi o mea manaia na matauina.E feteenai ma le malamalama, e foliga mai o le AgNP-II e sili ona maaleale i suiga o le SPR, ae o isi faʻataʻitaʻiga e lua e itiiti le maaleale.I suʻesuʻega a le SPR, o le 50 nm o le faʻatapulaʻaina o le tele o vaega, lea e faʻaaogaina e iloagofie ai vaega e faʻavae i luga o latou meatotino dielectric.O vaega laiti e laʻititi nai lo le 50 nm (AgNP-I ma AgNP-II) e mafai ona faʻamatalaina o ni dipoles dielectric faigofie, aʻo vaega e oʻo atu pe sili atu i lenei tapulaʻa (AgNP-III) e sili atu ona lavelave meatotino dielectric, ma o latou resonance Ua vaeluaina le fusi i suiga multimodal. .I le tulaga o ni fa'ata'ita'iga laiti laiti e lua, e mafai ona ta'ua AgNP o ni dipoles faigofie, ma o le plasma e faigofie ona so'a.A'o fa'atupula'ia le lapopo'a, o le so'otaga lea e maua mai ai se plasma lapo'a, lea e mafai ona fa'amatalaina ai le maualuga o le ma'ale'ale ua matauina.29 Ae ui i lea, mo vaega pito sili ona tele, o le fua faʻatatau faigofie dipole e le aoga pe a mafai foi ona tupu isi setete faʻapipiʻi, lea e mafai ona faʻamatalaina le faʻaititia o le AgNP-III e faʻaalia ai suiga mataʻutia.29
I lalo oa tatou tulaga faʻataʻitaʻiga, ua faʻamaonia ai o le tau o le pH o loʻo i ai se aafiaga loloto i le mautu o le colloidal o le citrate-coated silver nanoparticles o ituaiga eseese.I totonu o nei faiga, o loʻo tuʻuina atu le mautu e le faʻaleagaina -COO- vaega i luga o le AgNPs.O le vaega galue carboxylate o le citrate ion o loʻo faʻapipiʻiina i se numera tele o H + ion, o lea e le mafai ai e le vaega o le carboxyl gaosia ona tuʻuina atu le faʻafefe eletise i le va o vaega, e pei ona faʻaalia i le laina pito i luga o le Ata 4. E tusa ai ma le mataupu faavae a Le Chatelier, AgNP fa'ata'ita'iga vave fa'aputu'e ile pH 3, ae fa'asolosolo ona mautu pe a fa'atuputeleina le pH.
Ata 4 Fa'ata'ita'iga faiga o feso'ota'iga i luga o lo'o fa'amatalaina e ala i fa'aputuga i lalo ole pH eseese (laina pito i luga), fa'aogaina ole NaCl (laina ogatotonu), ma biomolecules (laina pito i lalo).
E tusa ai ma le Ata 5, sa suʻesuʻeina foʻi le faʻamautuina o le colloidal i le AgNP suspensions o lapopoa eseese i lalo o le faʻateleina o le masima.Faʻavae i luga o le zeta gafatia, o le faʻateleina o le nanoparticle tele i totonu o nei citrate-terminated AgNP system toe maua ai le faʻaleleia atili o le tetee atu i aʻafiaga mai fafo mai le NaCl.I le AgNP-I, 10 mM NaCl ua lava e faʻaosofia ai le faʻapipiʻi malie, ma o le masima masima o le 50 mM e maua ai iʻuga tutusa.I AgNP-II ma AgNP-III, 10 mM NaCl e le afaina tele le zeta gafatia ona o latou tau e tumau i (AgNP-II) poʻo lalo (AgNP-III) -30 mV.Faʻateleina le faʻaogaina o le NaCl i le 50 mM ma mulimuli ane i le 150 mM NaCl ua lava lea e faʻaitiitia ai le taua atoatoa o le gafatia o le zeta i faʻataʻitaʻiga uma, e ui lava o vaega tetele o loʻo taofia ai le tele o tau leaga.O nei fa'ai'uga o lo'o ogatasi ma le fa'amoemoega fa'atatau o le hydrodynamic diameter o AgNPs;ole fua ole laina ole Z ole fua ile 10, 50, ma le 150 mM NaCl o lo'o fa'aalia ai le ese'ese, fa'asolosolo fa'atuputeleina tau.Mulimuli ane, na maua ai fa'aputuga micron-size i fa'ata'ita'iga uma e tolu 150 mM.
Ata 5 O le malosi o le faʻasalalauina o le malamalama o faʻataʻitaʻiga o le citrate-terminated silver nanoparticles sample ma le faʻateleina o le tele (10 nm: AgNP-I, 20 nm: AgNP-II ma 50 nm: AgNP-III) o loʻo faʻaalia o le averesi hydrodynamic diameter (Z averesi. ) (taumatau) ma le zeta gafatia (agavale) suia i totonu ole 24 itula i lalo ole fa'a'ese'esega ole NaCl.
O taunuuga o le UV-Vis i le Faʻamatalaga Faʻaopoopo S2 o loʻo faʻaalia ai o le SPR o le 50 ma le 150 mM NaCl i faʻataʻitaʻiga uma e tolu o loʻo i ai se faʻaitiitia vave ma taua.E mafai ona faʻamatalaina lenei mea e le DLS, ona o le faʻapipiʻiina o le NaCl e sili atu le vave nai lo faʻataʻitaʻiga faʻalagolago i le pH, lea e faʻamatalaina e le eseesega tele i le va o le vave (0, 1.5, ma le 3 itula) fua.E le gata i lea, o le faʻateleina o le masima o le a faʻateleina ai foi le faʻatagaina o le faʻataʻitaʻiga, lea o le a i ai se aafiaga loloto i luga ole plasmon resonance.29
O le aʻafiaga o le NaCl o loʻo aoteleina i le laina ogatotonu o le Ata 4. I se tulaga lautele, e mafai ona faʻauʻuina o le faʻateleina o le faʻaogaina o le sodium chloride o loʻo i ai se aafiaga tutusa e pei o le faʻateleina o le acidity, ona o le Na + ions o loʻo i ai se uiga e faʻamaopoopo faʻatasi i vaega carboxylate, taofiofia le leaga zeta gafatia AgNPs.E le gata i lea, o le 150 mM NaCl na gaosia ai micron-sized aggregates i faʻataʻitaʻiga uma e tolu, e faʻaalia ai o le faʻaogaina o le electrolyte physiological e afaina ai le mautu o le citrate-terminated AgNPs.I le iloiloina o le condensing condensing concentration (CCC) o le NaCl i luga o faiga tutusa AgNP, o nei taunuuga e mafai ona tuʻuina ma le poto i tusitusiga talafeagai.Huynh et al.fuafuaina o le CCC o le NaCl mo citrate-terminated siliva nanoparticles ma le averesi lautele o 71 nm o 47.6 mM, ao El Badawy et al.matauina o le CCC o 10 nm AgNPs ma le citrate coating e 70 mM.10,16 E le gata i lea, o le maualuga maualuga o le CCC e tusa ma le 300 mM na fuaina e He et al., lea na mafua ai ona ese a latou auala faʻapipiʻi mai le lomiga na taʻua muamua.48 E ui lava o le sao o loʻo iai nei e le o faʻatatau i se suʻesuʻega atoatoa o nei tau, aua o loʻo faʻateleina a tatou tulaga faʻataʻitaʻiga i le lavelave o le suʻesuʻega atoa, o le faʻaogaina o le NaCl o le 50 mM, aemaise lava le 150 mM NaCl, e foliga mai e maualuga tele.Coagulation fa'aoso, fa'amatalaina suiga malolosi na maua.
O le isi la'asaga i le su'esu'ega polymerization o le fa'aogaina lea o molela'au faigofie ae fa'aolaola e fa'ata'ita'i ai feso'ota'iga nanoparticle-biomolecule.Faʻavae i luga ole DLS (Ata 6 ma 7) ma UV-Vis taunuʻuga (Ata Faʻaopoopo S3 ma S4), o nisi faʻamatalaga lautele e mafai ona faʻamaonia.I lalo oa tatou tulaga faʻataʻitaʻiga, o le suʻesuʻeina o mole o le kulukose ma le glutamine o le a le faʻaosoina faʻatasi i soʻo se faiga AgNP, aua o le Z-mean e fesoʻotaʻi vavalalata ma le tau o fua faʻatatau.E ui o lo latou i ai e le afaina ai le faʻapipiʻiina, o faʻataʻitaʻiga faʻataʻitaʻiga e faʻaalia ai o nei molelaʻau o loʻo faʻapipiʻiina i luga o le AgNPs.O le fa'ai'uga sili ona iloga e lagolagoina ai lenei manatu o le va'aia lea o le suiga i le fa'amama malamalama.E ui lava e le faʻaalia e le AgNP-I le umi o le galu poʻo le malosi o suiga, e mafai ona vaʻaia atili e ala i le fuaina o vaega tetele, lea e sili ona mafua ona o le sili atu o le faʻaogaina o mata na taʻua muamua.Po o le a lava le faʻatonuga, o le kulukose e mafai ona mafua ai se suiga mumu tele pe a uma le 1.5 itula pe a faʻatusatusa i le fua faʻatatau, e tusa ma le 40 nm i AgNP-II ma e uiga i le 10 nm i AgNP-III, lea e faʻamaonia ai le faʻaalia o fegalegaleaiga i luga.Na faʻaalia e le Glutamine se faʻataʻitaʻiga tutusa, ae o le suiga e leʻi iloagofie.E le gata i lea, e taua foi le taʻua o le glutamine e mafai ona faʻaitiitia ai le malosi o le zeta o mea laiti ma tetele.Ae ui i lea, talu ai o nei suiga o le zeta e foliga mai e le afaina ai le tulaga faʻapipiʻi, e mafai ona faʻamaonia e oʻo lava i meaola laiti e pei o le glutamine e mafai ona tuʻuina atu se tikeri o le faʻaogaina o le vaʻaia i le va o vaega.
Ata 6 O le malosi o le faʻataʻapeʻapeina o le malamalama o faʻataʻitaʻiga o le citrate-terminated silver nanoparticle samples ma le faʻateleina o le tele (10 nm: AgNP-I, 20 nm: AgNP-II ma 50 nm: AgNP-III) o loʻo faʻaalia o le averesi hydrodynamic diameter (Z averesi) (taumatau) I lalo ole tulaga i fafo ole kulukose eseese, ole zeta gafatia (agavale) e suia i totonu ole 24 itula.
Ata 7 O le malosi o le faʻasalalauina o le malamalama o faʻataʻitaʻiga o le citrate-terminated silver nanoparticles sample ma le faʻateleina o le tele (10 nm: AgNP-I, 20 nm: AgNP-II ma 50 nm: AgNP-III) o loʻo faʻaalia o le averesi hydrodynamic diameter (Z averesi. ) (taumatau) I le iai o le glutamine, o le zeta potential (agavale) e suia i totonu ole 24 itula.
I se faapuupuuga, o meaola laiti e pei o le kulukose ma le glutamine e le afaina ai le mautu o le colloidal i le fua fa'atatau: e ui lava e a'afia ai le zeta gafatia ma UV-Vis i'uga i tikeri eseese, o le fua faatatau Z e le tutusa.O loʻo faʻaalia ai o le adsorption luga o molelaʻau e taofia ai le faʻafefe electrostatic, ae i le taimi lava e tasi e maua ai le mautu.
Ina ia mafai ona faʻafesoʻotaʻi faʻaiʻuga talu ai ma taunuʻuga talu ai ma faʻataʻitaʻiina tulaga olaola sili atu ona tomai, na matou filifilia nisi o vaega faʻaoga masani a le cell culture ma faʻaaogaina e fai ma faʻataʻitaʻiga tulaga mo le suʻesuʻeina o le mautu o AgNP colloids.I le faʻataʻitaʻiga atoa o le in vitro, o se tasi o galuega sili ona taua a le DMEM e avea o se auala o le faʻavaeina lea o tulaga osmotic talafeagai, ae mai se vailaʻau faʻapitoa, o se vaifofo masima lavelave ma le malosi atoa o le ionic e tutusa ma le 150 mM NaCl. .40 Ae mo le FBS, o se faʻafefiloi lavelave o biomolecules-tele lava polotini-mai le vaaiga o le adsorption luga, e iai ni mea e tutusa ai ma faʻataʻitaʻiga o le kulukose ma le glutamine, e ui lava i le vailaʻau ma le eseesega E sili atu le lavelave.19 DLS ma le UV-O fa'ai'uga va'aia o lo'o fa'aalia i le Ata 8 ma le Fa'aopoopo S5, e mafai ona fa'amatalaina e ala i le su'esu'eina o le vaila'au o mea nei ma fa'amaopoopoina ma fua i le vaega muamua.
Ata 8 O faʻamaʻi faʻamalama faʻamalama faʻataʻapeʻapeina o le citrate-terminated silver nanoparticles sample ma faʻateleina le tele (10 nm: AgNP-I, 20 nm: AgNP-II ma 50 nm: AgNP-III) o loʻo faʻaalia o le averesi hydrodynamic diameter (Z averesi ) (taumatau) I le i ai o vaega faʻaleaganuʻu sela DMEM ma FBS, zeta gafatia (agavale) suiga i totonu ole 24 itula.
O le faʻafefeteina o AgNPs o lapopoʻa eseese i le DMEM e tutusa lona aʻafiaga i le faʻamautuina o le colloidal i le mea na matauina i le i ai o maualuga maualuga NaCl.O le faʻasalalauina o le AgNP i le 50 v / v% DMEM na faʻaalia ai le faʻapipiʻiina o le tele-tele na iloa ma le faʻateleina o le zeta gafatia ma le tau Z-average ma le faʻaitiitia o le malosi o le SPR.E taua le maitauina o le maualuga o le aofaʻi o le aofaʻi na faʻaosoina e le DMEM pe a uma le 24 itula e faʻatusatusa i le tele o nanoparticles muamua.
O le fegalegaleaiga i le va o le FBS ma le AgNP e talitutusa ma le mea na matauina i le i ai o mole laʻititi e pei o le kulukose ma le glutamine, ae o le aʻafiaga e malosi atu.Ole fua ole Z ole vaega ole vaega e tumau pea e le afaina, ae o le faateleina o le zeta gafatia e iloa.O le maualuga o le SPR na faʻaalia ai sina suiga mumu, ae atonu e sili atu le manaia, o le malosi o le SPR e leʻi faʻaitiitia tele e pei o le fua faʻatonutonu.O nei taunuʻuga e mafai ona faʻamatalaina e ala i le faʻaogaina o macromolecules i luga o le nanoparticles (laina pito i lalo i le Ata 4), lea ua malamalama nei o le faʻavaeina o le biomolecular corona i le tino.49