Tá Javascript díchumasaithe i do bhrabhsálaí faoi láthair.Nuair atá javascript díchumasaithe, ní oibreoidh roinnt feidhmeanna den suíomh Gréasáin seo.
Cláraigh do shonraí sonracha agus drugaí sainiúla spéise, agus déanfaimid an fhaisnéis a sholáthraíonn tú a mheaitseáil le hailt inár mbunachar sonraí fairsing agus seolfaimid cóip PDF chugat trí ríomhphost go tráthúil.
An bhfuil nanacháithníní níos lú i gcónaí níos fearr?Na héifeachtaí bitheolaíocha a bhaineann le comhiomlánú nanacháithníní airgid a bhraitheann ar mhéid a thuiscint faoi choinníollacha atá ábhartha ó thaobh na bitheolaíochta de
Údair: Bélteky P, Rónavári A, Zakupszky D, Boka E, Igaz N, Szerencsés B, Pfeiffer I, Vágvölgyi C, Kiricsi M, Kónya Z
Péter Bélteky,1,* Andrea Rónavári,1,* Dalma Zakupszky,1 Eszter Boka,1 Nóra Igaz,2 Bettina Szerencsés,3 Ilona Pfeiffer,3 Csaba Vágvölgyi,3 Mónika Kiricsi na Ceimice Comhshaoil, an Ungáir, an Ungáir agus Eolaíocht na Faisnéise , Ollscoil Szeged;2 Roinn na Bithcheimice agus na Bitheolaíochta Móilíneach, Dámh na hEolaíochta agus na Faisnéise, Ollscoil Szeged, an Ungáir;3 Roinn na Micribhitheolaíochta, Dámh na hEolaíochta agus na Faisnéise, Ollscoil Szeged, an Ungáir;Grúpa Taighde Cinéitic Imoibrithe agus Ceimic Dromchla 4MTA-SZTE, Szeged, an Ungáir* Chuir na húdair seo go cothrom leis an saothar seo.Cumarsáid: Zoltán Kónya Roinn na Ceimice Feidhmí agus Comhshaoil, Dámh na hEolaíochta agus na Faisnéisíochta, Ollscoil Szeged, Cearnóg Rerrich 1, Szeged, H-6720, An Ungáir Fón +36 62 544620 Ríomhphost [Cosaint ríomhphoist] Aidhm: Tá nanacháithníní airgid (AgNPs) ceann de na nana-ábhair is coitianta a ndéantar staidéar orthu, go háirithe mar gheall ar a bhfeidhmeanna bithleighis.Mar sin féin, mar gheall ar chomhiomlánú na nanacháithníní, is minic a chuirtear i gcontúirt i meáin bhitheolaíocha a gcuid cíteatocsaineachta den scoth agus gníomhaíocht antibacterial.San obair seo, rinneadh staidéar ar iompar comhiomlánaithe agus ar ghníomhaíochtaí bitheolaíocha gaolmhara de thrí shampla nana-cháithníní airgid citrate-fhoirceannadh le trastomhas meán de 10, 20, agus 50 nm.Modh: Úsáid leictreon-mhicreascóp tarchurtha chun nanacháithníní a shintéisiú agus a thréithriú, meastóireacht a dhéanamh ar a n-iompraíocht chomhiomlánaithe ag luachanna pH éagsúla, NaCl, glúcóis agus tiúchan glutamine trí scaipthe solais dinimiciúil agus speictreascópacht ultraivialait-infheicthe.Ina theannta sin, i gcultúr cille comhpháirteanna mheán ar nós Dulbecco feabhsaíonn an t-iompar comhiomlánaithe i Meán-Iolar agus Séiream lao féatais.Torthaí: Léiríonn na torthaí go gcothaíonn pH aigéadach agus ábhar leictrilít fiseolaíoch go ginearálta comhiomlánú ar scála miocrón, ar féidir é a idirghabháil trí fhoirmiú corónach bithmhóilíneach.Is fiú a thabhairt faoi deara go léiríonn cáithníní níos mó friotaíocht níos fearr le tionchair sheachtracha ná a gcomhghleacaithe beaga.Rinneadh tástálacha cíteatocsaineachta in vitro agus antibacterial trí chealla a chóireáil le comhiomláin nanacháithníní ag céimeanna éagsúla comhiomlánaithe.Conclúid: Léiríonn ár dtorthaí comhghaol domhain idir cobhsaíocht cholóideach agus tocsaineacht AgNPanna, toisc go gcailltear gníomhaíocht bhitheolaíoch iomlán as comhiomlánú foircneach.Tá tionchar suntasach ag an leibhéal níos airde frith-chomhiomlánaithe a breathnaíodh do cháithníní níos mó ar thocsaineacht in vitro, toisc go gcoimeádann samplaí den sórt sin níos mó gníomhaíochta frithmhiocróbach agus cille mamaigh.Baintear de thátal as na torthaí seo, in ainneoin na tuairime ginearálta sa litríocht ábhartha, go mb’fhéidir nach é an beart is fearr díriú ar na nanacháithníní is lú is féidir.Eochairfhocail: fás síl-idirghabhála, cobhsaíocht cholóideach, iompar comhiomlánaithe atá ag brath ar mhéid, tocsaineacht damáiste comhiomlánaithe
De réir mar a leanann éileamh agus aschur na n-ábhar ag méadú, tugtar aird níos mó agus níos mó ar a ngníomhaíocht bhithshábháilteachta nó bitheolaíoch.Tá nanacháithníní airgid (AgNPanna) ar cheann de na hionadaithe is coitianta a dhéantar a shintéisiú, a ndéantar taighde orthu agus a úsáidtear den aicme seo ábhar mar gheall ar a n-airíonna catalaíoch, optúla agus bitheolaíocha den scoth.1 Creidtear go ginearálta go ndéantar tréithe uathúla nana-ábhar (lena n-áirítear AgNPanna) a chur i leith a n-achar dromchla mór sainiúil go príomha.Mar sin, is é an fhadhb dosheachanta ná aon phróiseas a dhéanann difear don phríomhghné seo, mar shampla méid na gcáithníní, sciath dromchla Nó comhiomlánú, cibé an ndéanfaidh sé damáiste mór d'airíonna na nanacháithníní atá ríthábhachtach d'iarratais shonracha.
Is ábhair iad éifeachtaí mhéid na gcáithníní agus cobhsaitheoirí atá doiciméadaithe sách maith sa litríocht.Mar shampla, is é an dearcadh a nglactar leis go ginearálta ná go bhfuil nanacháithníní níos lú níos tocsaineach ná nanacháithníní níos mó.2 Ag teacht leis an litríocht ghinearálta, léirigh ár staidéir roimhe seo an ghníomhaíocht méid-spleách nana-silver ar chealla mamaigh agus miocrorgánaigh.3– 5 Is tréith eile é bratú dromchla a bhfuil tionchar leathan aige ar airíonna nana-ábhar.Díreach trí chobhsaitheoirí a chur leis nó a mhodhnú ar a dhromchla, d'fhéadfadh go mbeadh airíonna fisiceacha, ceimiceacha agus bitheolaíocha go hiomlán difriúil ag an nana-ábhar céanna.Is minic a dhéantar feidhmiú gníomhairí caipínithe mar chuid de shintéis na nanacháithníní.Mar shampla, tá nanacháithníní airgid citrate-foirceannadh ar cheann de na AgNPanna is ábhartha sa taighde, a shintéisítear trí laghdú salainn airgid i dtuaslagán cobhsaitheoir roghnaithe mar mheán imoibrithe.6 Is féidir le citrate leas a bhaint as go héasca ar a chostas íseal, infhaighteacht, bith-chomhoiriúnacht, agus cleamhnas láidir le haghaidh airgid, ar féidir a léiriú in idirghníomhaíochtaí beartaithe éagsúla, ó asaithe dromchla inchúlaithe go hidirghníomhaíochtaí ianach.Úsáidtear móilíní beaga agus iain pholaatamaíocha in aice le 7,8, mar shampla citrates, polaiméirí, polyelectrolytes, agus gníomhairí bitheolaíocha go coitianta freisin chun nana-airgid a chobhsú agus feidhmiúlachtaí uathúla a dhéanamh air.9-12
Cé gur réimse an-suimiúil é an fhéidearthacht gníomhaíocht na nanacháithníní a athrú trí uasteorannú dromchla d'aon ghnó, is beag an ról atá ag an sciath dromchla seo, rud a sholáthraíonn cobhsaíocht cholóideach don chóras nanacháithníní.Déanfaidh an t-achar dromchla mór ar leith de nana-ábhair fuinneamh dromchla mór a tháirgeadh, rud a chuireann bac ar chumas teirmidinimice an chórais a íosmhéid fuinnimh a bhaint amach.13 Gan cobhsú cuí, féadfaidh ceirtleáil nana-ábhar a bheith mar thoradh air seo.Is éard atá i gcomhiomlánú ná comhiomláin cáithníní de chruthanna agus de mhéideanna éagsúla a fhoirmiú a tharlaíonn nuair a thagann cáithníní scaipthe le chéile agus nuair a cheadaíonn idirghníomhaíochtaí teirmidinimiciúla reatha na cáithníní cloí lena chéile.Dá bhrí sin, úsáidtear cobhsaitheoirí chun comhiomlánú a chosc trí fhórsa repulsive mór go leor a thabhairt isteach idir na cáithníní chun gníomhú in aghaidh a mhealladh teirmidinimice.14
Cé go ndearnadh iniúchadh críochnúil ar an ábhar ar mhéid na gcáithníní agus ar an gclúdach dromchla i gcomhthéacs a rialáil ar ghníomhaíochtaí bitheolaíocha a spreagann nanacháithníní, is limistéar é comhiomlánú na gcáithníní a ndearnadh faillí orthu den chuid is mó.Níl beagnach aon staidéar críochnúil ann chun cobhsaíocht cholóideach na nanacháithníní a réiteach faoi choinníollacha atá ábhartha ó thaobh na bitheolaíochta.10,15-17 Ina theannta sin, tá an ranníocaíocht seo go háirithe annamh, i gcás ina bhfuil staidéar déanta freisin ar an tocsaineacht a bhaineann le comhiomlánú, fiú má d'fhéadfadh sé a bheith ina chúis le frithghníomhartha díobhálacha, mar thrombosis soithíoch, nó cailliúint saintréithe inmhianaithe, amhail a thocsaineacht, mar shampla. léirithe i bhFíor 1.18, 19 léirithe.Go deimhin, tá baint ag ceann den bheagán meicníochtaí ar fhriotaíocht nanacháithníní airgid le comhiomlánú, toisc go dtuairiscítear go laghdaítear a n-íogaireacht nanacháithníní E. coli agus Pseudomonas aeruginosa go laghdaítear a n-íogaireacht nana-airgid tríd an próitéin flagellin, flagellin a chur in iúl.Tá ard-chleamhnas aige le hairgead, rud a chothaíonn comhiomlánú.20
Tá roinnt meicníochtaí éagsúla ann a bhaineann le tocsaineacht nanacháithníní airgid, agus bíonn tionchar ag comhiomlánú ar na meicníochtaí seo go léir.Maidir leis an modh gníomhaíochta bitheolaíoch AgNP is mó a pléadh, dá ngairtear an mheicníocht “Capall Trojan” uaireanta, féachtar ar na AgNPanna mar iompróirí Ag+.1,21 Is féidir le meicníocht capall Trojan a chinntiú go dtiocfaidh méadú mór ar an tiúchan áitiúil Ag+, rud a fhágann go ngintear ROS agus dípolarú membrane.22-24 D’fhéadfadh tionchar a bheith ag comhiomlánú ar scaoileadh Ag+, rud a chuireann isteach ar thocsaineacht, toisc go laghdaíonn sé an dromchla gníomhach éifeachtach áit ar féidir iain airgid a ocsaídiú agus a thuaslagadh.Mar sin féin, ní hamháin go léireoidh AgNPanna tocsaineacht trí scaoileadh ian.Ní mór go leor idirghníomhaíochtaí a bhaineann le méid agus moirfeolaíocht a mheas.Ina measc, is iad méid agus cruth an dromchla nanoparticle na saintréithe sainmhínithe.4,25 Is féidir bailiúchán na meicníochtaí seo a chatagóiriú mar “mheicníochtaí spreagtha tocsaineachta”.D'fhéadfadh go leor imoibrithe mitochondrial agus membrane dromchla a bheith ann a d'fhéadfadh damáiste a dhéanamh d'orgáin agus bás cille a chur faoi deara.25-27 Ós rud é go dtéann foirmiú comhiomláin i bhfeidhm go nádúrtha ar mhéid agus ar chruth réad airgid a aithníonn córais bheo, is féidir go gcuirfí isteach ar na hidirghníomhaíochtaí seo freisin.
Inár bpáipéar roimhe seo ar chomhiomlánú nanacháithníní airgid, léirigh muid nós imeachta scagtha éifeachtach comhdhéanta de thurgnaimh cheimiceacha agus in vitro bitheolaíocha chun staidéar a dhéanamh ar an bhfadhb seo.19 Is é Scaipeadh Solais Dinimiciúla (DLS) an teicníocht is fearr le haghaidh iniúchtaí den chineál seo mar is féidir leis an ábhar fótóin a scaipeadh ag tonnfhad atá inchomparáide le méid a cháithníní.Ós rud é go mbaineann luas tairiscint Brownian na gcáithníní sa mheán leachtach leis an méid, is féidir an t-athrú ar dhéine an tsolais scaipthe a úsáid chun trastomhas hidridinimiciúil meán (Z-mean) an tsampla leachta a chinneadh.28 Ina theannta sin, trí voltas a chur i bhfeidhm ar an sampla, is féidir poitéinseal zeta (ζ poitéinseal) an nanacháithnín a thomhas mar an gcéanna leis an meánluach Z.13,28 Má tá luach absalóideach an acmhainneacht zeta ard go leor (de réir na dtreoirlínte ginearálta> ±30 mV), ginfidh sé éirgeadh leictreastatach láidir idir na cáithníní chun an comhiomlánú a chomhrac.Is feiniméan optúil uathúil é athshondas plasmón dromchla tréith (SPR), a chuirtear i leith nanacháithníní miotail lómhara go príomha (Au agus Ag go príomha).29 Bunaithe ar ascaluithe leictreonacha (plasmóin dromchla) na n-ábhar seo ar an nanascála, is eol go bhfuil buaic ionsúcháin UV-Vis tréithiúil ag AgNPanna sféarúla gar do 400 nm.30 Úsáidtear déine agus athrú tonnfhad na gcáithníní chun torthaí DLS a fhorlíonadh, toisc gur féidir an modh seo a úsáid chun comhiomlánú nanacháithníní agus asaithe dromchla bithmhóilíní a bhrath.
Bunaithe ar an bhfaisnéis a fhaightear, déantar measúnú ar inmharthanacht cille (MTT) agus antibacterial ar bhealach ina gcuirtear síos ar thocsaineacht AgNP mar fheidhm de leibhéal comhiomlánaithe, seachas (an fachtóir is coitianta a úsáidtear) tiúchan nanacháithníní.Ligeann an modh uathúil seo dúinn an tábhacht as cuimse a bhaineann le leibhéal comhiomlánaithe i ngníomhaíocht bhitheolaíoch a léiriú, mar, mar shampla, go gcaillfidh AgNPanna citrate-fhoirceannadh a ngníomhaíocht bhitheolaíoch go hiomlán laistigh de chúpla uair an chloig mar gheall ar chomhiomlánú.19
San obair atá ann faoi láthair, tá sé mar aidhm againn ár ranníocaíochtaí roimhe seo a leathnú go mór i gcobhsaíocht colloidí bith-ghaolmhara agus a dtionchar ar ghníomhaíocht bhitheolaíoch trí staidéar a dhéanamh ar éifeacht mhéid nanacháithníní ar chomhiomlánú nanacháithníní.Gan amhras tá sé seo ar cheann de na staidéir ar nanacháithníní.Peirspictíocht níos airde agus 31 Chun an tsaincheist seo a imscrúdú, baineadh úsáid as modh fáis trí mheán na síolta chun AgNPanna citrate-fhoirceannadh a tháirgeadh i dtrí raon méideanna éagsúla (10, 20, agus 50 nm).6,32 mar cheann de na modhanna is coitianta.Maidir le nana-ábhair a úsáidtear go forleathan agus go rialta in iarratais leighis, roghnaítear AgNPanna citrate-fhoirceannadh de mhéideanna éagsúla chun staidéar a dhéanamh ar spleáchas méid féideartha na n-airíonna bitheolaíocha a bhaineann le comhiomlánú nana-silver.Tar éis AgNPanna de mhéideanna éagsúla a shintéisiú, rinneamar na samplaí a tháirgtear trí mhicreascópacht leictreoin tarchurtha (TEM) a shaintréithe, agus ansin scrúdaigh muid na cáithníní ag baint úsáide as an nós imeachta scagtha thuasluaite.Ina theannta sin, i láthair na gcultúir cille in vitro Meán Iolar Athraithe Dulbecco (DMEM) agus Séiream Bólachta Féatais (FBS), rinneadh measúnú ar an iompar comhiomlánaithe atá ag brath ar mhéid agus ar a iompar ag luachanna pH éagsúla, NaCl, glúcós, agus tiúchan glutamine.Déantar tréithe cíteatocsaineachta a chinneadh faoi choinníollacha cuimsitheacha.Léiríonn an comhdhearcadh eolaíoch gur fearr cáithníní níos lú go ginearálta;cuireann ár n-imscrúdú ardán ceimiceach agus bitheolaíoch ar fáil chun a chinneadh an amhlaidh atá.
Ullmhaíodh trí nanacháithníní airgid le raonta méide éagsúla ag an modh fáis trí mheán na síolta a mhol Wan et al., le coigeartuithe beaga.6 Tá an modh seo bunaithe ar laghdú ceimiceach, ag baint úsáide as níotráit airgid (AgNO3) mar fhoinse airgid, borohydride sóidiam (NaBH4) mar an gníomhaire laghdaitheora, agus citrate sóidiam mar an cobhsaitheoir.Ar dtús, ullmhaigh 75 ml de thuaslagán uiscí citrate 9 mM ó dhéhiodráit chiotráite sóidiam (Na3C6H5O7 x 2H2O) agus teas go 70°C.Ansin, cuireadh 2 mL de thuaslagán 1% w/v AgNO3 leis an meán imoibrithe, agus ansin doirteadh an tuaslagán borhydride sóidiam a bhí ullmhaithe go húr (2 mL 0.1% w/v) isteach sa mheascán ar bhealach anuas.Coinníodh an fionraí buí-donn mar thoradh air ag 70 ° C le corraigh go bríomhar ar feadh 1 uair an chloig, agus ansin fuaraithe go teocht an tseomra.Úsáidtear an sampla mar thoradh air (dá ngairtear AgNP-I as seo amach) mar bhunús le haghaidh fás síl-idirghabhála sa chéad chéim eile sintéise.
Chun fionraí cáithníní meánmhéide a shintéisiú (a shainítear mar AgNP-II), téigh tuaslagán citrate 90 mL 7.6 mM go 80 ° C, measc é le 10 mL AgNP-I, agus ansin measc 2 mL 1% w/v Tuaslagán AgNO3 coinníodh é faoi stirring meicniúil bríomhar ar feadh 1 uair an chloig, agus ansin fuaraíodh an sampla go teocht an tseomra.
Maidir leis an gcáithnín is mó (AgNP-III), déan an próiseas fáis céanna arís, ach sa chás seo, bain úsáid as 10 mL de AgNP-II mar fhionraí síolta.Tar éis do na samplaí teocht an tseomra a bhaint amach, socraíonn siad a dtiúchan ainmniúil Ag bunaithe ar an ábhar iomlán AgNO3 go 150 ppm trí thuaslagóir breise a chur leis nó a ghalú ag 40 ° C, agus ar deireadh iad a stóráil ag 4 ° C go dtí go n-úsáidfear a thuilleadh iad.
Úsáid FEI Tecnai G2 20 X-Twin Transmission Leictreon Mhicreascóip (TEM) (Ceanncheathrú Corparáideach FEI, Hillsboro, Oregon, SAM) le 200 kV voltas luasghéarú chun scrúdú a dhéanamh ar thréithe moirfeolaíocha na nanacháithníní agus a ghabháil a patrún díraonta leictreon (ED).Rinneadh measúnú ar 15 íomhá ionadaíocha ar a laghad (~ 750 cáithníní) ag baint úsáide as an bpacáiste bogearraí ImageJ, agus cruthaíodh na histeagraim mar thoradh air sin (agus gach graif sa staidéar iomlán) in OriginPro 2018 (OriginLab, Northampton, MA, USA) 33, 34.
Rinneadh meántrastomhas hidridinimiciúil (Z-meán), poitéinseal zeta (ζ-acmhainneacht) agus athshondas plasmón dromchla tréith (SPR) na samplaí a thomhas chun a n-airíonna collóideach tosaigh a léiriú.Rinneadh meántrastomhas hidridinimiciúil agus poitéinseal zeta an tsampla a thomhas ag ionstraim Malvern Zetasizer Nano ZS (Malvern Instruments, Malvern, RA) ag baint úsáide as cealla ribeach fillte indiúscartha ag 37±0.1°C.Baineadh úsáid as Ocean Optics 355 DH-2000-BAL speictreafótaiméadar UV-Vis (Halma PLC, Largo, FL, SAM) chun tréithe tréithiúla SPR a fháil ó speictrim ionsú UV-Vis samplaí sa raon 250-800 nm.
Le linn an turgnaimh ar fad, rinneadh trí chineál tomhais éagsúla a bhaineann le cobhsaíocht colloidal ag an am céanna.Bain úsáid as DLS chun trastomhas hidrodinimiciúil meán (meán Z) agus poitéinseal zeta (ζ poitéinseal) na gcáithníní a thomhas, toisc go bhfuil an meán Z gaolmhar le meánmhéid na gcomhiomlán nanacháithníní, agus léiríonn an poitéinseal zeta cibé an bhfuil an éaradh leictreastatach sa chóras. láidir go leor chun tarraingt Van der Waals idir nanacháithníní a fhritháireamh.Déantar tomhais faoi thrí, agus ríomhann bogearraí Zetasizer an diall caighdeánach de mheán Z agus poitéinseal zeta.Déantar speictreascópacht UV-Vis a mheas ar shaintréithe SPR na gcáithníní, mar is féidir le hathruithe ar bhuaic-déine agus ar thonnfhad comhiomlánú agus idirghníomhaíochtaí dromchla a léiriú.29,35 Go deimhin, tá an oiread sin tionchair ag athshondas plasmón dromchla i miotail lómhara go bhfuil modhanna nua anailíse ar bhithmhóilíní mar thoradh air.29,36,37 Tá tiúchan AgNPanna sa mheascán turgnamhach thart ar 10 ppm, agus is é an cuspóir déine an ionsú tosaigh uasta SPR a shocrú go 1. Rinneadh an turgnamh ar bhealach a bhraitheann ar an am ag 0;1.5;3;6;12 agus 24 uair an chloig faoi choinníollacha éagsúla atá ábhartha ó thaobh na bitheolaíochta de.Tá níos mó sonraí ag cur síos ar an turgnamh le feiceáil inár gcuid oibre roimhe seo.19 I mbeagán focal, luachanna pH éagsúla (3; 5; 7.2 agus 9), clóiríd sóidiam éagsúla (10 mM; 50 mM; 150 mM), glúcóis (3.9 mM; 6.7 mM) agus glutamine (4 mM) tiúchan, agus D'ullmhaigh Meán-Iolar Athraithe Dulbecco (DMEM) agus Séiream Bólachta Féatais (FBS) (in uisce agus DMEM) mar chórais mhúnla freisin, agus rinne staidéar ar a n-éifeachtaí ar iompar comhiomlánaithe na nanacháithníní airgid sintéisithe.pH Déantar luachanna NaCl, glúcóis, agus glutamine a mheas bunaithe ar thiúchan fiseolaíocha, agus tá na méideanna DMEM agus FBS mar an gcéanna leis na leibhéil a úsáidtear sa turgnamh in vitro iomlán.38-42 Rinneadh na tomhais go léir ag pH 7.2 agus 37 ° C le tiúchan salann cúlra tairiseach de 10 mM NaCl chun aon idirghníomhaíochtaí cáithníní fad-achair a dhíchur (seachas turgnaimh áirithe a bhaineann le pH agus NaCl, áit a bhfuil na tréithe seo na hathróga faoi. staidéar).28 Tá achoimre ar liosta na gcoinníollacha éagsúla i dTábla 1. Úsáidtear an turgnamh atá marcáilte le † mar thagairt agus comhfhreagraíonn sé do shampla ina bhfuil NaCl 10 mM agus pH 7.2.
Fuarthas líne ceall ailse próstatach daonna (DU145) agus keratinocytes daonna neamhbhásaithe (HaCaT) ó ATCC (Manassas, VA, USA).Saothraítear cealla go rialta i meán riachtanach íosta Dulbecco Eagle (DMEM) ina bhfuil glúcóis 4.5 g/L (Sigma-Aldrich, Saint Louis, MO, SAM), arna fhorlíonadh le 10% FBS, 2 mM L-glutamine, 0.01 % Streptomycin agus 0.005% Peinicillin (Sigma-Aldrich, St. Louis, Missouri, USA).Saothraítear na cealla i gorlann 37°C faoi 5% CO2 agus 95% de thaise.
D'fhonn na hathruithe i cíteatocsaineacht AgNP de bharr comhiomlánú cáithníní a iniúchadh ar bhealach atá ag brath ar am, rinneadh measúnacht MTT dhá chéim.Ar dtús, rinneadh inmharthanacht an dá chineál cille a thomhas tar éis cóireála le AgNP-I, AgNP-II agus AgNP-III.Chuige sin, cuireadh an dá chineál cealla isteach i bplátaí 96 tobar ag dlús 10,000 cill/tobar agus déileáladh leo le trí mhéideanna éagsúla nanacháithníní airgid i dtiúchan méadaithe ar an dara lá.Tar éis 24 uair an chloig de chóireáil, nite na cealla le PBS agus gorta le 0.5 mg/mL imoibrí MTT (SERVA, Heidelberg, an Ghearmáin) caolaithe i meán cultúir ar feadh 1 uair ag 37 ° C.Díscaoileadh criostail Formazan i DMSO (Sigma-Aldrich, Saint Louis, MO, SAM), agus tomhaiseadh an ionsú ag 570 nm ag baint úsáide as léitheoir pláta Synergy HTX (BioTek-Ungáir, Búdaipeist, an Ungáir).Meastar gurb é luach ionsú an tsampla rialaithe neamhchóireáilte ná ráta marthanais 100%.Déan ar a laghad 3 thurgnamh ag baint úsáide as ceithre mhacasamhlú bitheolaíocha neamhspleácha.Ríomhtar IC50 ó chuar freagartha dáileoige bunaithe ar thorthaí beogachta.
Ina dhiaidh sin, sa dara céim, trí na cáithníní a ghoradh le 150 mM NaCl ar feadh tréimhsí éagsúla ama (0, 1.5, 3, 6, 12, agus 24 uair an chloig) roimh chóireáil cille, táirgeadh stáit comhiomlánaithe éagsúla nanacháithníní airgid.Ina dhiaidh sin, rinneadh an measúnú MTT céanna mar a thuairiscítear roimhe seo chun athruithe ar inmharthanacht cille a mbíonn tionchar ag comhiomlánú na gcáithníní orthu a mheas.Úsáid GraphPad Prism 7 chun an toradh deiridh a mheas, ríomh tábhacht staitistiúil an turgnaimh le t-tástáil neamhphéireáilte, agus marcáil a leibhéal mar * (p ≤ 0.05), ** (p ≤ 0.01), *** (p ≤ 0.001). ) Agus **** (p ≤ 0.0001).
Baineadh úsáid as trí mhéideanna éagsúla nanacháithníní airgid (AgNP-I, AgNP-II agus AgNP-III) le haghaidh so-ghabhálacht antibacterial do Cryptococcus neoformans IFM 5844 (IFM; Ionad Taighde d'Fungas Pataigineach agus Tocsaineolaíocht Miocróbach, Ollscoil Chiba) agus Bacillus Tástála megaterium SZMC 6031 (SZMC: Bailiúchán Micribhitheolaíochta Szeged) agus E. coli SZMC 0582 i meán RPMI 1640 (Sigma-Aldrich Co.).D'fhonn meastóireacht a dhéanamh ar na hathruithe ar ghníomhaíocht antibacterial de bharr comhiomlánú na gcáithníní, ar dtús, socraíodh a n-íoschruinniú coisctheach (MIC) trí microdilution i pláta microtiter 96-tobar.Go 50 μL de fhionraí cille caighdeánaithe (5 × 104 cealla / mL i meán RPMI 1640), cuir 50 μL d'fhionraí nanacháithníní airgid agus caolaigh go sraitheach dhá uair an tiúchan (sa mheán thuasluaite, is é an raon 0 agus 75 ppm, Is é sin, cuimsíonn an sampla rialaithe 50 μL de fhionraí cille agus 50 μL de mheán gan nanacháithníní).Ina dhiaidh sin, goradh an pláta ag 30 ° C ar feadh 48 uair an chloig, agus tomhaiseadh dlús optúil an chultúir ag 620 nm ag baint úsáide as léitheoir pláta Nano SPECTROstar (BMG LabTech, Offenburg, an Ghearmáin).Rinneadh an turgnamh faoi thrí.
Ach amháin gur úsáideadh 50 μL de shamplaí nanacháithníní comhiomlánaithe aonair ag an am seo, baineadh úsáid as an nós imeachta céanna a thuairiscítear roimhe seo chun éifeacht an chomhiomlánaithe ar ghníomhaíocht antibacterial ar na cineálacha thuasluaite a scrúdú.Déantar staideanna comhiomlánaithe éagsúla nanacháithníní airgid a tháirgeadh trí na cáithníní a ghoradh le 150 mM NaCl ar feadh tréimhsí éagsúla ama (0, 1.5, 3, 6, 12, agus 24 uair an chloig) roimh phróiseáil cille.Baineadh úsáid as fionraí arna fhorlíonadh le 50 μL de mheán RPMI 1640 mar rialú fáis, agus chun tocsaineacht a rialú, baineadh úsáid as fionraí le nanacháithníní neamh-chomhiomlánaithe.Rinneadh an turgnamh faoi thrí.Bain úsáid as GraphPad Prism 7 chun an toradh deiridh a mheas arís, ag baint úsáide as an anailís staitistiúil céanna leis an anailís MTT.
Tá leibhéal comhiomlánaithe na gcáithníní is lú (AgNP-I) tréithrithe, agus foilsíodh na torthaí go páirteach inár gcuid oibre roimhe seo, ach chun comparáid níos fearr a dhéanamh, rinneadh scagadh críochnúil ar na cáithníní go léir.Bailítear agus pléitear na sonraí turgnamhacha sna hailt seo a leanas.Trí mhéid AgNP.19
D'fhíoraigh tomhais a rinne TEM, UV-Vis agus DLS sintéis rathúil gach sampla AgNP (Fíor 2A-D).De réir an chéad tsraith de Fíor 2, léiríonn an cáithnín is lú (AgNP-I) moirfeolaíocht sféarúil aonfhoirmeach le trastomhas meán de thart ar 10 nm.Soláthraíonn an modh fáis síolta-idirghabhála freisin AgNP-II agus AgNP-III le raonta méide éagsúla le trastomhais na gcáithníní meán de thart ar 20 nm agus 50 nm, faoi seach.De réir diall caighdeánach dáileadh na gcáithníní, níl forluí ar mhéideanna na dtrí shampla, rud atá tábhachtach dá n-anailís chomparáideach.Trí chomparáid a dhéanamh idir an meánchóimheas gné agus an cóimheas thinness de réamh-mheastacháin cáithníní TEM-bhunaithe 2D, glactar leis go ndéantar sféaracht na gcáithníní a mheas le breiseán scagaire cruth ImageJ (Fíor 2E).43 De réir na hanailíse ar chruth na gcáithníní, níl tionchar ag fás na gcáithníní ar a gcóimheas gné (taobh mór / taobh gearr den dronuilleog teorannach is lú), agus a gcóimheas thinness (achar tomhaiste den chiorcal foirfe comhfhreagrach / limistéar teoiriciúil ) laghdú de réir a chéile.Mar thoradh air seo tá níos mó agus níos mó cáithníní polyhedral, atá cruinn go foirfe go teoiriciúil, a fhreagraíonn do chóimheas thinness de 1.
Figiúr 2 Íomhá micreascóp leictreon tarchurtha (TEM) (A), patrún díraonta leictreon (ED) (B), histeagram dáileadh méide (C), speictream ionsú solais sainiúil ultraivialait-infheicthe (UV-Vis) (D), agus citrate meán-sreabhán Tá trí raon méide éagsúla ag nanacháithníní airgid críochfoirt le trastomhas meicniúil (Z-meán), acmhainneacht zeta, cóimheas gné agus tiús (E): Is é AgNP-I 10 nm (as a chéile barr), is é AgNP -II 20 nm (lár an tsraith ), Is é AgNP-III (bun) 50 nm.
Cé go raibh tionchar ag nádúr timthriallach an mhodha fáis ar chruth na gcáithníní go pointe áirithe, rud a d'fhág go raibh sféaracht níos lú ag AgNPanna níos mó, d'fhan na trí shampla go léir quasi-sféarúil.Ina theannta sin, mar a thaispeántar sa phhatrún díraonta leictreon i bhFíor 2B, nana Níl tionchar ag criostalacht na gcáithníní.Tá an fáinne díraonta feiceálach - ar féidir é a chomhghaolú le hinnéacsanna airgid (111), (220), (200), agus (311) Miller - an-chomhsheasmhach leis an litríocht eolaíoch agus lenár ranníocaíochtaí roimhe seo.9, 19,44 Tá ilroinnt fáinne Debye-Scherrer de AgNP-II agus AgNP-III mar gheall ar an bhfíric go bhfuil an íomhá ED gafa ag an formhéadú céanna, ionas go n-ardóidh méid na gcáithníní, líon na gcáithníní díraonta in aghaidh an. méaduithe agus laghduithe achar aonaid.
Is eol go gcuireann méid agus cruth na nanacháithníní isteach ar ghníomhaíocht bhitheolaíoch.3,45 Is féidir gníomhaíocht chatalaíoch agus bhitheolaíoch atá ag brath ar chruth a mhíniú tríd an bhfíric go mbíonn claonadh ag cruthanna éagsúla aghaidheanna criostail áirithe a iomadú (ag innéacsanna éagsúla Miller), agus tá gníomhaíochtaí éagsúla ag na aghaidheanna criostail seo.45,46 Ós rud é go soláthraíonn na cáithníní ullmhaithe torthaí ED comhchosúla a fhreagraíonn do shaintréithe criostail an-chosúil, is féidir glacadh leis gur cheart aon difríochtaí a breathnaíodh a chur i leith méid Nanoparticle inár dturgnaimh chobhsaíochta collóideach agus gníomhaíocht bhitheolaíoch ina dhiaidh sin, ní ar na hairíonna cruth.
Leagann na torthaí UV-Vis a bhfuil achoimre orthu i bhFíor 2D béim bhreise ar nádúr sféarúil ró-mhór an AgNP sintéiseithe, toisc go bhfuil beanna SPR na dtrí shampla go léir thart ar 400 nm, arb é luach tréith de nanacháithníní airgid sféarúil.29,30 Dheimhnigh an speictrim a gabhadh freisin go raibh fás rathúil ar nana-airgead trí mheán na síol.De réir mar a mhéadaíonn méid na gcáithníní, an tonnfhad a fhreagraíonn don ionsú solais uasta de AgNP-II - níos suntasaí-De réir na litríochta, AgNP-III Taithí deargshift.6,29
Maidir le cobhsaíocht cholóideach tosaigh an chórais AgNP, baineadh úsáid as DLS chun meán-trastomhas hidridinimiciúil agus poitéinseal zeta na gcáithníní ag pH 7.2 a thomhas.Léiríonn na torthaí a léirítear i bhFíor 2E go bhfuil cobhsaíocht cholóideach níos airde ag AgNP-III ná ag AgNP-I nó AgNP-II, toisc go léiríonn treoirlínte coitianta go bhfuil acmhainneacht zeta de 30 mV absalóideach riachtanach le haghaidh cobhsaíochta collóideach fadtéarmach. Tugtar tacaíocht bhreise don toradh seo nuair a cuirtear meánluach Z (a fhaightear mar mheán-trastomhas hidridinimiciúil na gcáithníní saora agus comhiomlána) i gcomparáid leis an méid cáithníní príomhúla a fhaigheann TEM, toisc go bhfuil an dá luach níos dlúithe, is ea is séimhe an chéim Cruinnigh sa sampla.Go deimhin, tá meán Z AgNP-I agus AgNP-II réasúnta níos airde ná a bpríomhmhéid cáithníní arna measúnú ag TEM, mar sin i gcomparáid le AgNP-III, meastar go mbeidh na samplaí seo níos dóchúla comhiomlán, áit a bhfuil an poitéinseal zeta an-diúltach. ag gabháil leis méid gar An meánluach Z.
Is féidir an míniú ar an bhfeiniméan seo a bheith faoi dhó.Ar thaobh amháin, coimeádtar an tiúchan chiotráite ag leibhéal comhchosúil i ngach céim shintéise, ag soláthar méid réasúnta ard de ghrúpaí dromchla luchtaithe chun achar dromchla sonrach na gcáithníní atá ag fás a chosc ó laghdú.Mar sin féin, de réir Levak et al., is féidir móilíní beaga cosúil le citrate a mhalartú go héasca trí bhithmhóilíní ar dhromchla na nanacháithníní.Sa chás seo, is é corónach na bithmhóilíní a tháirgtear a chinnfidh cobhsaíocht colóideach.31 Toisc gur breathnaíodh an t-iompar seo inár dtomhais chomhiomlánaithe freisin (a pléadh go mion níos déanaí), ní féidir le huasteorainn chiotráite amháin an feiniméan seo a mhíniú.
Ar an láimh eile, tá méid na gcáithníní comhréireach inbhéartach leis an gclaonadh comhiomlánaithe ar leibhéal na nanaiméadar.Tacaíonn an modh traidisiúnta Derjaguin-Landau-Verwey-Overbeek (DLVO) leis seo go príomha, áit a gcuirtear síos ar mhealladh cáithníní mar shuim na bhfórsaí mealltacha agus repulsive idir cáithníní.De réir He et al., laghdaítear luach uasta cuar fuinnimh DLVO le méid na nanacháithníní sna nanacháithníní hematite, rud a fhágann go bhfuil sé níos éasca an t-íosmhéid fuinnimh príomhúil a bhaint amach, rud a chuireann comhiomlánú do-aisiompaithe (comhdhlúthú) chun cinn.47 Mar sin féin, tá tuairimíocht ann go bhfuil gnéithe eile lasmuigh de theorainneacha na teoirice DLVO.Cé go bhfuil domhantarraingt van der Waals agus éirgeadh ciseal dúbailte leictreastatach cosúil le méadú ar mhéid na gcáithníní, léirigh athbhreithniú ag Hotze et al.molann sé go mbeidh éifeacht níos láidre aige ar chomhiomlánú ná mar a cheadaíonn DLVO.14 Creideann siad nach féidir cuaire dromchla na nanacháithníní a mheas a thuilleadh mar dhromchla réidh, rud a fhágann nach bhfuil meastachán matamaitice infheidhme.Ina theannta sin, de réir mar a laghdaíonn méid na gcáithníní, éiríonn céatadán na n-adamh atá i láthair ar an dromchla níos airde, rud a fhágann go dtiocfaidh struchtúr leictreonach agus iompar muirear dromchla.Agus athraíonn imoibríocht dromchla, rud a d'fhéadfadh laghdú ar an muirear sa chiseal dúbailte leictreach a bheith mar thoradh agus comhiomlánú a chur chun cinn.
Nuair a dhéantar comparáid idir torthaí DLS AgNP-I, AgNP-II, agus AgNP-III i bhFíor 3, thugamar faoi deara gur léirigh na trí shampla go léir comhiomlánú leideanna pH den chineál céanna.Aistríonn timpeallacht an-aigéadach (pH 3) poitéinseal zeta an tsampla go 0 mV, rud a fhágann go gcruthaíonn cáithníní comhiomláin ar mhéid miocrón, agus aistríonn pH alcaileach a acmhainneacht zeta go luach diúltach níos mó, áit a ndéanann na cáithníní comhiomláin níos lú (pH 5). ).Agus 7.2) ), nó fanann siad go hiomlán neamh-chomhiomlán (pH 9).Breathnaíodh freisin roinnt difríochtaí tábhachtacha idir na samplaí éagsúla.Le linn an turgnaimh, bhí AgNP-I ar na cinn is íogaire d'athruithe féideartha zeta spreagtha pH, toisc gur laghdaíodh acmhainneacht zeta na gcáithníní seo ag pH 7.2 i gcomparáid le pH 9, agus níor léirigh AgNP-II agus AgNP-III ach A. tá athrú suntasach ar ζ thart ar pH 3. Ina theannta sin, léirigh AgNP-II athruithe níos moille agus acmhainneacht measartha zeta, agus léirigh AgNP-III an t-iompar is lú de na trí cinn, toisc gur léirigh an córas an luach zeta iomlán is airde agus gluaiseacht treochta mall, rud a léiríonn AgNP-III Is frithsheasmhach in aghaidh comhiomlánaithe de bharr pH.Tá na torthaí seo comhsheasmhach leis na torthaí tomhais trastomhas hidridinimiciúil meán.Ag cur san áireamh méid na gcáithníní ina n-primers, léirigh AgNP-I comhiomlánú leanúnach de réir a chéile ag gach luach pH, ​​is dócha mar gheall ar chúlra NaCl 10 mM, agus níor léirigh AgNP-II agus AgNP-III ach suntasach ag pH 3 As a bheith ag bailiú.Is é an difríocht is suimiúla ná, in ainneoin a mhéid nanacháithníní móra, go ndéanann AgNP-III na comhiomláin is lú ag pH 3 i 24 uair an chloig, ag cur béime ar a chuid airíonna frith-chomhiomlánaithe.Trí mheán Z de AgNPanna a roinnt ag pH 3 tar éis 24 uair an chloig de réir luach an tsampla ullmhaithe, is féidir a thabhairt faoi deara go bhfuil méadú 50 uair, 42 uair, agus 22 uair ar mhéideanna comhiomlána coibhneasta AgNP-I agus AgNP-II. , faoi seach.III.
Fíor 3 Cuirtear torthaí scaipthe solais dinimiciúil an tsampla nanacháithníní airgid citrate-foirceannadh le méid méadaithe (10 nm: AgNP-I, 20 nm: AgNP-II agus 50 nm: AgNP-III) in iúl mar an meán-trastomhas hidridinimiciúil (meán Z. ) (ar dheis) Faoi choinníollacha pH éagsúla, athraíonn an poitéinseal zeta (ar chlé) laistigh de 24 uair an chloig.
Chuir an comhiomlánú braite pH-spleách isteach freisin ar shaintréithe athshondas plasmón dromchla (SPR) na samplaí AgNP, mar is léir óna speictrim UV-Vis.De réir Figiúr Forlíontach S1, tar éis comhiomlánú na dtrí fhionraí nanacháithníní airgid go léir tá laghdú ar dhéine a mbuaiceanna SPR agus athrú measartha dearg.Tá méid na n-athruithe seo mar fheidhm de chuid pH comhsheasmhach leis an méid comhiomlánaithe atá tuartha ag torthaí DLS, ach breathnaíodh roinnt treochtaí suimiúla.Murab ionann agus intuition, tharla sé gurb é an AgNP-II meánmhéide an ceann is íogaire d'athruithe SPR, cé nach bhfuil an dá shampla eile chomh íogair.I dtaighde SPR, is é 50 nm an teorainn teoiriciúil ar mhéid na gcáithníní, a úsáidtear chun idirdhealú a dhéanamh ar cháithníní bunaithe ar a n-airíonna tréleictreach.Is féidir cur síos a dhéanamh ar cháithníní níos lú ná 50 nm (AgNP-I agus AgNP-II) mar dhépholaí tréleictreach simplí, agus tá airíonna tréleictreach níos casta ag cáithníní a shroicheann nó a sháraíonn an teorainn seo (AgNP-III), agus a n-athshondas scoilteann an banna ina athruithe ilmhódacha. .I gcás dhá shampla cáithníní níos lú, is féidir AgNPanna a mheas mar dhépholaí simplí, agus is féidir leis an plasma forluí go héasca.De réir mar a mhéadaíonn méid na gcáithníní, táirgeann an cúpláil seo plasma níos mó go bunúsach, rud a d'fhéadfadh an íogaireacht níos airde a breathnaíodh a mhíniú.29 Mar sin féin, i gcás na gcáithníní is mó, níl an meastachán dépholach simplí bailí nuair a d'fhéadfadh stáit cúplála eile tarlú freisin, ar féidir leo claonadh laghdaithe AgNP-III athruithe speictreach a léiriú a mhíniú.29
Faoi ár gcoinníollacha turgnamhacha, tá sé cruthaithe go bhfuil tionchar as cuimse ag an luach pH ar chobhsaíocht collóideach na nanacháithníní airgid citrate-brataithe de mhéideanna éagsúla.Sna córais seo, soláthraítear cobhsaíocht ag na grúpaí -COO- a ghearrtar go diúltach ar dhromchla AgNPanna.Tá grúpa feidhme carboxylate an ian chiotráite prótónáitithe i líon mór ian H +, agus mar sin ní féidir leis an ngrúpa carboxyl ginte éaradh leictreastatach idir na cáithníní a sholáthar a thuilleadh, mar a thaispeántar sa tsraith barr i bhFíor 4. De réir phrionsabal Le Chatelier, AgNP comhiomlánaíonn samplaí go tapa ag pH 3, ach de réir a chéile éiríonn siad níos cobhsaí de réir mar a mhéadaíonn an pH.
Figiúr 4 Meicníocht scéimeach idirghníomhaíochta dromchla arna sainmhíniú ag comhiomlánú faoi pH éagsúla (as a chéile barr), tiúchan NaCl (an tsraith lár), agus bithmhóilíní (bun an tsraith).
De réir Fíor 5, rinneadh scrúdú freisin ar chobhsaíocht colóideach i bhfionraí AgNP de mhéideanna éagsúla faoi thiúchan salainn méadaithe.Bunaithe ar an acmhainneacht zeta, cuireann an méadú ar mhéid nanacháithníní sna córais AgNP citrate-fhoirceannadh seo friotaíocht feabhsaithe ar thionchair sheachtracha ó NaCl ar fáil arís.In AgNP-I, is leor 10 mM NaCl chun comhiomlánú éadrom a spreagadh, agus soláthraíonn tiúchan salainn 50 mM torthaí an-chosúil.In AgNP-II agus AgNP-III, ní chuireann 10 mM NaCl isteach go mór ar an acmhainneacht zeta toisc go bhfanann a luachanna ag (AgNP-II) nó faoi bhun (AgNP-III) -30 mV.Is leor an tiúchan NaCl a mhéadú go 50 mM agus ar deireadh go 150 mM NaCl chun luach absalóideach an acmhainneacht zeta a laghdú go suntasach i ngach sampla, cé go gcoimeádann cáithníní níos mó lucht diúltach níos mó.Tá na torthaí seo comhsheasmhach le meántrastomhas hidridinimiciúil ionchais AgNPanna;léiríonn na línte treochta meán Z arna dtomhas ar 10, 50, agus 150 mM NaCl luachanna difriúla, ag méadú de réir a chéile.Ar deireadh, aimsíodh comhiomláin ar mhéid miocrón i ngach ceann de na trí thurgnamh 150 mM.
Fíor 5 Cuirtear torthaí scaipthe solais dinimiciúil an tsampla nanacháithníní airgid citrate-foirceannadh le méid méadaithe (10 nm: AgNP-I, 20 nm: AgNP-II agus 50 nm: AgNP-III) in iúl mar an meán-trastomhas hidridinimiciúil (meán Z. ) (ar dheis) agus poitéinseal zeta (ar chlé) athraíonn laistigh de 24 uair an chloig faoi thiúchan NaCl éagsúla.
Léiríonn na torthaí UV-Vis i bhFíor Forlíontach S2 go bhfuil laghdú meandarach agus suntasach ar an SPR de 50 agus 150 mM NaCl i ngach ceann de na trí shampla.Is féidir é seo a mhíniú le DLS, toisc go dtarlaíonn comhiomlánú bunaithe ar NaCl níos tapúla ná turgnaimh atá ag brath ar pH, rud a mhínítear leis an difríocht mhór idir na tomhais luatha (0, 1.5, agus 3 uair an chloig).Ina theannta sin, méadóidh méadú ar an tiúchan salainn freisin ceadúlacht choibhneasta an mheáin thurgnamhaigh, a mbeidh tionchar as cuimse aige ar athshondas plasmón dromchla.29
Déantar achoimre ar éifeacht NaCl sa tsraith lár i bhFíor 4. Go ginearálta, is féidir a thabhairt i gcrích go bhfuil an éifeacht chéanna ag méadú ar thiúchan clóiríd sóidiam le méadú ar an aigéadacht, toisc go bhfuil claonadh ag hiain Na+ comhordú a dhéanamh ar fud na ngrúpaí carboxylate, AgNPanna féideartha zeta diúltacha a shochtadh.Ina theannta sin, tháirg 150 mM NaCl comhiomláin micron-iarrachtaí sna trí shampla go léir, rud a léiríonn go bhfuil an tiúchan leictrilít fiseolaíoch díobhálach do chobhsaíocht cholóideach AgNPanna citrate-fhoirceannadh.Trí bhreithniú a dhéanamh ar an tiúchan comhdhlúthaithe criticiúil (CCC) de NaCl ar chórais chomhchosúla AgNP, is féidir na torthaí seo a chur go cliste sa litríocht ábhartha.Dúirt Huynh et al.ríomh go raibh CCC NaCl do nanacháithníní airgid citrate-fhoirceannadh le trastomhas meán de 71 nm 47.6 mM, agus El Badawy et al.faoi ​​deara go raibh an CCC de 10 nm AgNPs le sciath chiotráite 70 mM.10,16 Ina theannta sin, rinne He et al., an CCC suntasach ard de thart ar 300 mM a thomhas, rud a d'fhág go raibh a modh sintéise difriúil ón bhfoilseachán a luadh roimhe seo.48 Cé nach bhfuil an ranníocaíocht reatha dírithe ar anailís chuimsitheach ar na luachanna seo, toisc go bhfuil ár gcoinníollacha turgnamhacha ag méadú i gcastacht an staidéir iomláin, is cosúil go bhfuil an tiúchan NaCl ábhartha go bitheolaíoch de 50 mM, go háirithe 150 mM NaCl, sách ard.Téachtadh spreagtha, ag míniú na n-athruithe láidre a braitheadh.
Is é an chéad chéim eile sa turgnamh polaiméirithe móilíní simplí ach ábhartha ó thaobh na bitheolaíochta a úsáid chun idirghníomhaíochtaí nanacháithníní-bithmhóilín a insamhail.Bunaithe ar thorthaí DLS (Fíoracha 6 agus 7) agus UV-Vis (Figiúirí Forlíontacha S3 agus S4), is féidir roinnt conclúidí ginearálta a dhearbhú.De réir ár gcoinníollacha turgnamhacha, ní spreagfaidh na móilíní a ndearnadh staidéar orthu glúcóis agus glutamine comhiomlánú in aon chóras AgNP, toisc go bhfuil dlúthbhaint ag treocht Z-meán leis an luach tomhais tagartha comhfhreagrach.Cé nach gcuireann a láithreacht isteach ar chomhiomlánú, léiríonn torthaí turgnamhacha go bhfuil na móilíní seo asaithe go páirteach ar dhromchla AgNPanna.Is é an toradh is suntasaí a thacaíonn leis an tuairim seo ná an t-athrú a breathnaíodh ar ionsú solais.Cé nach léiríonn AgNP-I athruithe bríonna tonnfhad nó déine, is féidir é a fheiceáil níos soiléire trí cháithníní níos mó a thomhas, rud is dóichí mar gheall ar an íogaireacht optúil níos mó a luadh níos luaithe.Beag beann ar an tiúchan, is féidir le glúcóis aistriú dearg níos mó a chur faoi deara tar éis 1.5 uair an chloig i gcomparáid leis an tomhas rialaithe, atá thart ar 40 nm in AgNP-II agus thart ar 10 nm in AgNP-III, rud a chruthaíonn idirghníomhaíochtaí dromchla.Léirigh Glutamine treocht den chineál céanna, ach ní raibh an t-athrú chomh soiléir.Ina theannta sin, is fiú a lua freisin gur féidir le glutamine acmhainneacht iomlán zeta cáithníní meánmhéide agus mór a laghdú.Mar sin féin, ós rud é nach cosúil go gcuireann na hathruithe zeta seo isteach ar an leibhéal comhiomlánaithe, is féidir tuairimíocht a dhéanamh go bhféadfaidh fiú bithmhóilíní beaga cosúil le glutamine méid áirithe d'éaradh spásúil a sholáthar idir cáithníní.
Fíor 6 Léirítear torthaí scaipthe solais dinimiciúil samplaí nanacháithníní airgid citrate-foirceannadh le méid méadaithe (10 nm: AgNP-I, 20 nm: AgNP-II agus 50 nm: AgNP-III) mar an meán-trastomhas hidrodinimiciúil (meán Z). (ar dheis) Faoi choinníollacha seachtracha de thiúchan glúcóis éagsúla, athraíonn an poitéinseal zeta (ar chlé) laistigh de 24 uair an chloig.
Fíor 7 Cuirtear torthaí scaipthe solais dinimiciúil an tsampla nanacháithníní airgid citrate-foirceannadh le méid méadaithe (10 nm: AgNP-I, 20 nm: AgNP-II agus 50 nm: AgNP-III) in iúl mar an meán-trastomhas hidridinimiciúil (meán Z. ) (ar dheis) I láthair glutamine, athraíonn an poitéinseal zeta (ar chlé) laistigh de 24 uair an chloig.
I mbeagán focal, ní dhéanann bithmhóilíní beaga cosúil le glúcóis agus glutamine difear do chobhsaíocht cholóideach ag an tiúchan tomhaiste: cé go gcuireann siad isteach ar acmhainneacht zeta agus torthaí UV-Vis go céimeanna éagsúla, níl na meántorthaí Z comhsheasmhach.Léiríonn sé seo go bhfuil an asaithe dromchla móilíní inhibits éaradh leictreastatach, ach ag an am céanna soláthraíonn cobhsaíocht tríthoiseach.
D'fhonn na torthaí roimhe seo a nascadh leis na torthaí roimhe seo agus coinníollacha bitheolaíocha a insamhail níos sciliúla, roghnaigh muid cuid de na comhpháirteanna cultúir cille is coitianta a úsáidtear agus d'úsáid muid iad mar choinníollacha turgnamhacha chun staidéar a dhéanamh ar chobhsaíocht colloids AgNP.Sa turgnamh in vitro ar fad, is é ceann de na feidhmeanna is tábhachtaí atá ag DMEM mar mheán ná na coinníollacha osmotic riachtanacha a bhunú, ach ó thaobh ceimiceacha, is réiteach casta salainn é le neart iomlán ianach cosúil le 150 mM NaCl .40 Maidir le FBS, is meascán casta é de bhithmhóilíní-próitéiní den chuid is mó-ó thaobh an asaithe dromchla, tá roinnt cosúlachtaí aige le torthaí turgnamhacha glúcóis agus glutamine, in ainneoin an chomhdhéanamh ceimiceach agus éagsúlacht gnéis i bhfad níos casta.19 DLS agus UV-Is féidir na torthaí infheicthe a thaispeántar i bhFíor 8 agus i bhFíor Forlíontach S5, faoi seach, a mhíniú trí chomhdhéanamh ceimiceach na n-ábhar seo a scrúdú agus iad a chomhghaolú leis na tomhais san alt roimhe seo.
Fíor 8 Cuirtear torthaí scaipthe solais dinimiciúil an tsampla nanacháithníní airgid citrate-foirceannadh le méid méadaithe (10 nm: AgNP-I, 20 nm: AgNP-II agus 50 nm: AgNP-III) in iúl mar an meán-trastomhas hidridinimiciúil (meán Z. ) (ar dheis) I láthair comhpháirteanna saothrán cille DMEM agus FBS, athraíonn poitéinseal zeta (ar chlé) laistigh de 24 uair an chloig.
Tá tionchar comhchosúil ag caolú AgNPanna de mhéideanna éagsúla i DMEM ar chobhsaíocht cholóideach leis an éifeacht a breathnaíodh i láthair na dtiúchan NaCl arda.Léirigh scaipeadh AgNP i 50 v/v% DMEM gur aimsíodh comhiomlánú ar scála mór leis an méadú ar acmhainneacht zeta agus meánluach Z agus laghdú géar ar dhéine SPR.Is fiú a thabhairt faoi deara go bhfuil an méid comhiomlán uasta a tharlódh DMEM tar éis 24 uair an chloig comhréireach go contrártha le méid na nanacháithníní primer.
Tá an idirghníomhaíocht idir FBS agus AgNP cosúil leis an gceann a breathnaíodh i láthair móilíní níos lú cosúil le glúcóis agus glutamine, ach tá an éifeacht níos láidre.Níl aon tionchar fós ar mheán Z na gcáithníní, agus aimsítear méadú ar acmhainneacht zeta.Léirigh an bhuaic SPR athrú beag dearg, ach b'fhéidir níos suimiúla, níor tháinig laghdú chomh suntasach ar dhéine SPR agus a bhí sa tomhas rialaithe.Is féidir na torthaí seo a mhíniú trí asaithe dúchasach macramóilíní ar dhromchla na nanacháithníní (as a bun i bhFíor 4), a thuigtear anois mar fhoirmiú corónach bithmhóilíneach sa chorp.49